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【研究背景】当土壤pH<5时,铝以离子态释放到溶液中,直接抑制根伸长、植物生长,降低了酸性土壤上农作物的生产力。针对酸性土壤的铝毒问题,过去多采用施加石灰对表层土壤进行缓解,但用量较大且用量大、周期长,施用的石灰在地区间分布不均匀,运输费用高。因此,在采用各种措施降低土壤可溶性铝的同时,开发和选育耐铝的作物基因型是提高酸性土壤生产力、保护生态系统、促进农业可持续发展和生物修复的一条重要途径。本文以花生铝敏感型中花2号为研究对象,探讨花生在铝胁迫处理下的miR398与靶基因的差异表达及其功能分析,以进一步揭示花生铝诱导细胞程序性死亡中的调控机理。【材料与方法】以改良的Hoglang培养液培养一周的花生实生苗,以100μmol/L CaCl2预处理花生苗后,用100μmol/L AlCl3分别处理0、4、8、12、24h后提取花生苗根尖1 cm总RNA,使用实时荧光定量-聚合酶链式反应(qRT-PCR)进行分析,测定花生根尖超氧化物歧化酶、细胞色素c氧化酶活性,过氧化氢、超氧阴离子含量以及细胞死亡情况。【结果与分析】1、经AlCl3处理后的花生根尖miR398存在差异表达,在铝处理0-8h之间,miR398表达上调且4-8h差异显著,8h之后miR398表达量开始下降,8-12h差异极显著,但12-24h差异不显著。2、miR398靶基因Cu/Zn-SOD、COX表达量随着miR398的表达上调而降低,miR398的表达下调而升高,但12-24h时Cu/Zn SOD上调显著,而COX上调不显著。3、酶活性测定分析显示,SOD酶活性在0-8h降低,然后上升;COX酶活性在0-12h下降,12-24h上升。过氧化氢和超氧阴离子的含量均在0-8h出现上升,8-12h下降,而在12-24h有回升。4、通过evans blue染色测定其OD值发现,随着铝处理时间的增加,细胞死亡越来越多,且12-24h出现显著差异。【结论】在100μmol/L AlCl3处理不同时间下,miR398表达量的明显改变,抗氧化酶活性和ROS产生相反变化,表明miRNA可能通过抑制其靶基因Cu/Zn SOD、COX的表达,从而激活ROS,导致细胞程序性死亡的产生。