欧洲葡萄无核白体细胞胚循环保持及遗传转化系统的建立

被引量 : 0次 | 上传用户:gdcjr
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
通过提高葡萄体细胞胚再生途径中胚性材料保持、再生及转化效率,为葡萄自身基因功能验证及品种抗病性改良提供理论和技术依据。以欧洲葡萄‘无核白’(Vitis vinfera‘Thompson Seedless’)为研究材料,通过小花蕾、雄蕊、雌蕊进行初代胚性愈伤诱导并获得初代体细胞胚。通过3种再诱导培养基及5个阶段初代体细胞胚进行次生胚性愈伤诱导并建立循环保持系统,此系统中产生的胚性材料用于遗传转化研究;遗传转化中比较了转化材料种类、卡那霉素筛选浓度、延迟筛选时间和成苗方法等对遗传转化效率的影响;此外,将外源泛素连接酶基因(VpPUB23)转入欧洲葡萄‘无核白’,通过PCR、Southern blot、RT-PCR验证后对3个转基因株系接种葡萄白粉病菌验证基因功能。研究表明,鱼雷期和子叶中期的无核白体细胞胚最适宜诱导次生胚性组织,诱导率可达80%,利用其建立的循环系统,胚性愈伤至少保持了3年,保持体系中产生的体细胞胚、胚性愈伤、原胚团3种胚性材料均可用于葡萄遗传转化;初步确定体细胞胚成胚阶段卡那霉素筛选浓度为75mg·L-1,胚萌发阶段卡那霉素最佳筛选浓度为25 mg·L-1,3种胚性材料中,原胚团转化效果最好,浸染后延迟筛选4周最有利于转基因胚的生长,转基因胚于分别含有0.2:mg·L-1BA和0.25mg·L-1KT的培养基上培养最佳;共获得了转VpPUB23的无核白葡萄315个株系,3个转基因株系表现对葡萄白粉病抗性降低。
其他文献
选题点评:网络发展之后,阅读开始重新定义,网络与书籍成为一体两面。电子界面的阅览和纸张界面的披读,成为相辅相成的途径与工具。我们正式由“读书”时代进入“阅读”时代。基于
台北书展上一本美国经验版的《谁说出版不赚钱?——出版者的成功管理法则》(高宝版),极大地吸引了读者的目光,也由此引发了一个凝聚开放性的话题。
每个人内心都有渴望飞翔的翅膀。有一只叫Dodo的小鸡,它从小就受到其他小鸡的嘲笑,因为它长得跟其他小鸡不一样,它有锋利的喙和长长的羽毛。后来Dodo的母亲Tada对它说:“每个小鸡
行动导向的教学是具有国际领先水平的教学模式,它将认知过程和职业活动结合在一起,强调完整的学习过程是获得对事物处理时的完整性行动。本选题从北京市求实职业学校网络技术专
<正> 为探讨呼吸操和呼吸阻力锻炼对肺功能的影响,我们对46例慢阻肺(COPD)患者进行了治疗,收到较好的效果。现将观察结果报告如下。 对象与方法 一、对象 本组46例病人均为兰
目的:通过分析结核病疫情,探讨锡林郭勒盟(以下简称锡盟)结核病的控制对策.方法:利用1990年、1998年、2001年三次流调的资料,分析锡盟结核病疫情和流行现状.……
期刊
我国农村信用社通过近几年的发展,取得了不少成绩,但仍存在不少问题。本文试从农信社的金融供给与农村需求、管理体制、业务创新等方面分析,从而提出解决问题的建议,以找到改革的
医药产业作为当今高新技术产业之一,具有科技含量高、产品附加值高、高风险、高回报率、市场前景广阔等发展特点。同时医疗器械、医药包装、物流配送作为医药产业的发展组成