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通过提高葡萄体细胞胚再生途径中胚性材料保持、再生及转化效率,为葡萄自身基因功能验证及品种抗病性改良提供理论和技术依据。以欧洲葡萄‘无核白’(Vitis vinfera‘Thompson Seedless’)为研究材料,通过小花蕾、雄蕊、雌蕊进行初代胚性愈伤诱导并获得初代体细胞胚。通过3种再诱导培养基及5个阶段初代体细胞胚进行次生胚性愈伤诱导并建立循环保持系统,此系统中产生的胚性材料用于遗传转化研究;遗传转化中比较了转化材料种类、卡那霉素筛选浓度、延迟筛选时间和成苗方法等对遗传转化效率的影响;此外,将外源泛素连接酶基因(VpPUB23)转入欧洲葡萄‘无核白’,通过PCR、Southern blot、RT-PCR验证后对3个转基因株系接种葡萄白粉病菌验证基因功能。研究表明,鱼雷期和子叶中期的无核白体细胞胚最适宜诱导次生胚性组织,诱导率可达80%,利用其建立的循环系统,胚性愈伤至少保持了3年,保持体系中产生的体细胞胚、胚性愈伤、原胚团3种胚性材料均可用于葡萄遗传转化;初步确定体细胞胚成胚阶段卡那霉素筛选浓度为75mg·L-1,胚萌发阶段卡那霉素最佳筛选浓度为25 mg·L-1,3种胚性材料中,原胚团转化效果最好,浸染后延迟筛选4周最有利于转基因胚的生长,转基因胚于分别含有0.2:mg·L-1BA和0.25mg·L-1KT的培养基上培养最佳;共获得了转VpPUB23的无核白葡萄315个株系,3个转基因株系表现对葡萄白粉病抗性降低。