腺相关病毒介导R65核酶基因对高脂血清刺激人主动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

来源 :中华医学会第十五次全国心血管病学大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jinying5322446
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目的:通过9型重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus 9,rAAV9)载体介导R65核酶基因及增强型绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP)对体外培养人主动脉平滑肌细胞(Human Aortic Smooth Muscle Cells,HASMCs)进行转染,观察R65核酶基因过表达对高脂血清刺激后HASMCS增殖和凋亡的影响,为R65核酶基因成为理想的动脉粥样硬化基因治疗的候选基因提供实验基础.方法:rAA V 9-EGFP-R65重组腺病毒载体转染HASMCs后,采用Western blot检测不同时间细胞中P65,P50核蛋白的表达及B ax蛋白的表达;Alamar Blue法检测rAAV 9-EGFP-R65对高脂血清刺激后HASMCs的体外增殖抑制情况;转染72 h后流式细胞术检测rAAV 9-EGFP-R65诱导高脂血清刺激后HASMCS的凋亡率。结果:转染后1d,3d,5d,HASMCs组细胞中的P65,P50核蛋白表达明显降低;Alamar blue法检测显示R65基因过表达能明显抑制血清刺激后HVSMCs的增殖;流式细胞术检测显示转染72 h后,R65过表达能显著减轻高脂血清刺激后HVSMCs的凋亡。结论:R65基因过表达能有效抑制高脂血清刺激后HVSMCs的增殖,并抑制其凋亡,为腺病毒介导R65基因治疗动脉粥样硬化提供重要的实验基础。
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