【摘 要】
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目的 研究Islet-1诱导C3H10T1/2细胞定向分化为心肌细胞过程中表达增加的心肌特异蛋白基因GATA4,NKX2.5,MEF2c上组蛋白乙酰化水平的变化情况.方法 Islet-1基因慢病毒感染小鼠骨髓间充质干细胞C3H10,Western Blot检测转染后乙酰化的组蛋白H3表达情况,逆转录及实时荧光定量PCR时序性检测出心肌特异性蛋白基因GATA4,NKX2.5,MEF2c的mRNA表达
【机 构】
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重庆医科大学附属儿童医院、重庆医科大学儿科研究所、儿童发育疾病研究教育部重点实验室
【出 处】
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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议
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目的 研究Islet-1诱导C3H10T1/2细胞定向分化为心肌细胞过程中表达增加的心肌特异蛋白基因GATA4,NKX2.5,MEF2c上组蛋白乙酰化水平的变化情况.方法 Islet-1基因慢病毒感染小鼠骨髓间充质干细胞C3H10,Western Blot检测转染后乙酰化的组蛋白H3表达情况,逆转录及实时荧光定量PCR时序性检测出心肌特异性蛋白基因GATA4,NKX2.5,MEF2c的mRNA表达达高峰的时间点,采用染色质免疫共沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,CHIP),用CHIP级乙酰化H3抗体免疫沉淀与其所结合的DNA,采用实时荧光定量PCR扩增抗体所富集的心肌特异性蛋白基因GATA4,NKX2.5,MEF2c启动子区域的DNA量,比较感染组和未感染组与抗体所结合的上述三种心肌特异蛋白基因的表达情况.结果 感染高表达Islet-1的C3H10T1/2细胞乙酰化的组蛋白H3表达量较未感染组表达增加,在心肌特异性蛋白基因GATA4,NKX2.5,MEF2C的mRNA表达达高峰的两周时间点,乙酰化的H3抗体所结合的心肌特异性蛋白基因GATA4,NKX2.5,MEF2c与未转染Islet-1的细胞组相比较,表达增加.结论 高表达Islet-1之后C3H10T1/2细胞定向分化为心肌细胞过程中表达增加的心肌特异蛋白基因上组蛋白乙 酰化水平增高.
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