【摘 要】
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目的:分析铜绿假单胞菌在耐药性变化时菌株Ⅲ型分泌系统(TTSS)相关毒力蛋白的表达差异，并和患者的临床转归进行比对，探讨耐药性变化与细菌毒力变化的相关性。方法:筛选源于同一患者呼吸道、多次分离、药敏谱发生动态改变的的铜绿假单胞菌，用ERIC-PCR方法确定同一患者来源菌株的同源性，以同一克隆的菌株体系为研究对象，PCR了解TTSS的毒力基因型。双向电泳技术比较目标菌株的全菌蛋白表达谱，质谱分析差异
【机 构】
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重庆医科大学第一附属医院,重庆 400016 呼吸疾病国家重点实验室(广州医学院),广东 5102
【出 处】
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中华医学会第一届感染与抗微生物治疗论坛、第八届全国感染性疾病及抗微生物化疗学术会议
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目的:分析铜绿假单胞菌在耐药性变化时菌株Ⅲ型分泌系统(TTSS)相关毒力蛋白的表达差异，并和患者的临床转归进行比对，探讨耐药性变化与细菌毒力变化的相关性。方法:筛选源于同一患者呼吸道、多次分离、药敏谱发生动态改变的的铜绿假单胞菌，用ERIC-PCR方法确定同一患者来源菌株的同源性，以同一克隆的菌株体系为研究对象，PCR了解TTSS的毒力基因型。双向电泳技术比较目标菌株的全菌蛋白表达谱，质谱分析差异蛋白点，并在蛋白质数据库进行检索。收集患者临床信息，了解临床特征、细菌耐药性、毒力相关蛋白三者的关系。结果:筛选获得一个AECOPD合并肺炎患者符合入选条件，其1年内3次呼吸道分离出铜绿假单胞菌，药敏谱依次为：敏感-多重耐药(MDR)-泛耐药。菌株毒力基因属exoU+/exo S-型。双向电泳显示3株菌有17个差异表达蛋白，其中11个蛋白功能明确，9个与细菌代谢有关；在菌株毒力相关蛋白中，蛋白DsbA(二硫化物氧化还原酶A)在敏感株表达最低，泛耐株表达最高。临床信息显示，该患者在分离出PDR时，肺部感染最重，并于1个月后死亡。结论:铜绿假单胞菌在长期定植、感染过程中，环境的变化有可能导致细菌的耐药性发生变化，同时菌株毒力加强，共同导致感染难于控制。DsbA的高表达在增强铜绿假单胞菌的毒力改变上起了关键的作用。
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