论文部分内容阅读
目的：探讨在尿毒症毒素非对称性二甲基精氨酸(Asymmetric dimethylarginine,ADMA)致大鼠血管内皮损伤的病理条件下,血管活性肽Apelin-13对大鼠离体血管产生的效应及对血压的影响. 方法：①体重280g± 20g SD大鼠10只,随机分为ADMA组、对照组,每组5只.两组分别采用微量渗透泵持续皮下注入ADMA和生理盐水,时间为28天,剂量均为10mg/kg/d .在基线水平利用无创鼠尾动脉血压仪测量两组大鼠血压,并抽取尾静脉血用ELISA方法检测血清ADMA、一氧化氮(nitric oxide,NO),血浆vWF(von willebrand factor,vWF)、内皮素1(endothelin 1,ET-1)水平.28天后复测上述指标,然后给予各组大鼠尾静脉注射Apelin-13(10nmol/kg),复测血压.②大鼠麻醉处死后,行离体尾动脉舒缩实验.加入苯肾上腺素(PE,10-6mmol/L)预收缩,然后加入内皮依赖性血管舒张剂乙酰胆碱(Ach,10-5mmol/L),观察血管舒张程度,评价内皮完整性.重新平衡血管,对照组再次加入苯肾上腺素预收缩,然后加入Apelin-13(10-10-10-6mol/L),观察Apelin是否会引起血管舒张及曲线；ADMA组直接加入Apelin-13(10-10-10-6mol/L),观察Apelin是否会引起血管收缩及曲线.③使用透射电镜观察两组大鼠尾动脉血管环内皮细胞超微形态及血管壁的超微结构.两组血管环均分为Apelin-13(10-6mol/L)处理及未处理组,进行血管平滑肌层p-MLC表达的免疫组化检测.结果：①28天后,ADMA组大鼠收缩压较对照组明显升高 (154 ±5mmHg比123 ± 4mmHg,P＜0.01). 静脉注射Apelin-13(10 nmol/kg)后,ADMA组大鼠收缩压升高至162±4mmHg (P＜0.01),而对照组收缩压降至113±3 mmHg (P＜0.01).28天后ADMA组大鼠血清ADMA、NO,血浆vWF、ET-1浓度均明显高于对照组(p＜0.01).②体外实验证明ADMA组血管环对Ach的内皮依赖性舒张反应明显降低.Apelin-13(10-10-10-6mol/L)对ADMA组血管产生收缩效应而使对照组血管发生舒张,均呈浓度依赖性.③透射电镜下可观察到ADMA组大鼠血管内皮细胞出现明显细胞核畸形、胞浆空泡变性,部分内皮细胞崩解脱落,甚至出现内弹力层断裂的病理改变.而免疫组化结果表明Apelin-13(10-6mol/L)可促进ADMA组离体血管中层平滑肌p-MLC表达. 结论：Apelin-13可穿越ADMA损伤的血管内皮层,使血管平滑肌p-MLC表达增加,引起大鼠血管收缩、血压升高,这可能在一定程度上参与了慢性肾脏疾病患者高血压的发生、发展过程.