【摘 要】
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[目的]探讨血小板衍生因子(PDGF)及其受体抑制剂格列卫(Gleevec,STI571)分别单独应用及联合应用对人脐带间充质干细胞(MSCs)增殖、移行及相关基因BAX、MCL-1基因表达的变化,以探讨PDGF及STI571对人脐带间充质干细胞功能变化的影响,为评估MSCs的临床应用提供依据.[方法]采用MTT分析法检测不同实验组(EG)(1uM/LSTI571单用组(EG1),10uM/LST
【机 构】
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河北联合大学附属医院血液科 河北 唐山 063000
【出 处】
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河北省医学会血液学分会第七届年会暨河北省医师协会血液科医师分会第四届年会
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[目的]探讨血小板衍生因子(PDGF)及其受体抑制剂格列卫(Gleevec,STI571)分别单独应用及联合应用对人脐带间充质干细胞(MSCs)增殖、移行及相关基因BAX、MCL-1基因表达的变化,以探讨PDGF及STI571对人脐带间充质干细胞功能变化的影响,为评估MSCs的临床应用提供依据.[方法]采用MTT分析法检测不同实验组(EG)(1uM/LSTI571单用组(EG1),10uM/LSTI571单用组(EG2),25uM/LSTI571单用组(EG3),10ng/mlPDGF单用组(EG4),luM/L STI571与10ng/mlPDGF联用组(EG5),10uM/L STI571与10ng/mlPDGF联用组(EG6),25uM/L STI571与10ng/mlPDGF(EG7》)和对照组(CG)的MSCs在药物不同作用时间(24h,48h)下的0D值,比较MSCs的增殖情况.由上组实验中选出的有统计学意义的实验组和对照组(以下实验均采用该实验的分组及培养时间),采用细胞划痕的方法观察不同时间点MSCs的迁移情况.实时定量PCR检测不同组间MSCs的BAX和MCL-1基因表达改变.[结果]无论是单独应用PDGF还是单独应用STI571以及两者联合应用,对照组及实验组OD值均随着时间的延长而下降,两时间点之间无显著差异性；在同一时间点,与对照组相比较,单独应用PDGF组OD值升高,单独应用STI571组随剂量增加OD值下降,EG1与EG2无显著差异,EG3与CG及EG1、EG2均有显著差异性(p＜0.05),联合应用PDGF及STI571各实验组的OD值逐渐降低,以EG7下降明显(p＜0.05),提示PDGF对MSCs具有增殖作用,STI571对MSCs具有抑制作用.实时荧光定量PCR法检测对照组及各实验组MSCs Bax、Mcl-1 mRNA的表达,与对照组相比,两者联合应用组上述两基因均减少,EG5差异显著,且减小程度EG2＞EG1(p＜0.05)；与对照组相比,各实验组Bax mRNA的表达增强,出现了2-△△CT值的增大,且增大的程度EG2＞EG1 (p＜0.05). [结论](1) PDGF单独应用时能够促进MSC增殖. (2) STI571单独应用时抑制MSC增殖,促进其凋亡.(3)联合应用PDGF及STI571抑制MSC增殖.在本实验设定的浓度及时间范围内,STI571对MSC的抑制作用随浓度增加而增加. (4) STI571可以抑制MSCs迁移,PDGF促进MSCs迁移.
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