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玉米大斑病是我国东华北玉米区和西南玉米区重要的玉米叶部病害,严重为害玉米产量及安全生产,2013年在东北玉米产区,感病品种发生程度在5级以上,有些品种在有些地区已达9级.玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)是引起玉米大斑病的丝状病原真菌,该病菌能够产生DHN黑色素,且黑色素与病菌的侵染效能密切相关.初步研究发现,玉米大斑病菌St4HNR基因完成黑色素合成途径中的第一步脱氢反应,为进一步明确St4HNR基因的功能及与之关联的基因,本研究采用PCR方法扩增得到St4HNR基因cDNA中编码完整开放阅读框的基因片段,将该基因片段与克隆载体pMD19-T simple连接,测序无误后,定向重组到pGBKT7载体上,用酶切鉴定重组质粒；用醋酸锂法(Li-Ac)将正确的重组质粒转化人AH109酵母菌株,在缺陷性培养基上观察其AH109中的表达情况,检测诱饵载体有无毒性和单倍体及二倍体白激活功能.结果显汞,成功构建pG-BKT7-St4HNR酵母双杂诱饵表达载体；转化pGBKT7 -St4HNR质粒和pGBKT7空载体的酵母菌都能在SD/-Trp平板上长出白色菌落,在SD/ Trp/-His/- X-a-gal、SD/-Trp/-Ade/X-ce-gal平板上不能生长,两种酵母菌在SD/-Trp液体培养基中培养16h后,菌液的OD600均值都在0.9以上,说明诱饵载体成功转化,不具自主激活报告基因的功能且对酵母菌株AH109无细胞毒性.本研究成功构建了玉米大斑病菌黑色素还原酶基因St4HNR酵母双杂交诱饵载体,不具白激活现象,没有细胞毒性,可以利用酵母双杂交系统对该基因进行互作蛋白编码基因的筛选,推进全面揭示玉米大斑病菌致病相关基因调控网络和致病机理奠定坚实的基础.