褐飞虱延伸因子Elongation factors-1a的序列克隆和功能分析

来源 :中国植物保护学会2014年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kentron
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  利用褐飞虱[ Nilaparvata lugens(St(a)l)]转录组数据库,克隆到褐飞虱1个编码延伸因子elongation factors - 1a(EFI -a)的cDNA序列该序列长度为2 165bp,开放阅读框( ORF)为1 389bp,编码蛋白462个氨基酸,氨基酸序列与草翅叶蝉(Homa-lodlsca vitripennis)的相似性高达96%.半定量PCR分析发现,该基因在卵巢、卵、血淋巴唾液腺和中肠及脂肪体中高表达(图1).不同发育时期基因表达分析发现,该基因在褐飞虱羽化后表达量持续增高(图2).雌成虫的表达量显著高于.雄虫利用注射dsRNA进行干涉实验发现,3龄若虫注射后相比对对照,注射后6天若虫存活率开始下降,10天时存活率下降到21.7%~42.0%,对照注射GFP基因10天时存活率为95.0%(图2),发育到5龄时雄虫可正常发育,雌虫则不能正常蜕皮羽化注射5龄虫后,雌虫不能正常排卵,解剖卵巢显微观察发现,注射dsEFl -a的褐飞虱雌虫卵巢不能正常发育(图3).结果表明,蛋白质合成中的EFl -.基因与褐飞虱卵巢的正常发育密切相关(图4).关于EFI -a对褐飞虱生长发育和生殖影响的分子机制研究正在进行中.
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