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目的:初步探讨对孕妇外周血浆中游离DNA进行片段差异性分级分离达到富集胎儿DNA的方法。
方法:抽取孕中期孕妇外周静脉血5mL,离心后提取血浆DNA,琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段,回收<400bp、400-1000bp和1000-3000bp三部分凝胶中的DNA,扩增16个短串联重复序列(STR)遗传标志位点,ABI310基因分析仪检测,同时扩增和检测母亲白细胞基因组DNA和胎儿羊水细胞基因组DNA作对照。
结果:共完成了3例孕妇外周血标本共48个位点的检测。其中有意义点为31个。血浆总DNA、<400bp DNA、400-1000bp DNA和1000-3000bp DNA各组分成功位点数占有意义位点数的百分比分别为6.45%、29.03%、38.71%和9.68%,差异有统计学意义(X2=13.432,P=0.004),而<400bp DNA和400-1000bp DNA组分之间在成功比例上差异无统计学意义(X2=0.648,P=0.421)。
结论:回收<1000bp的孕妇血浆DNA片段应用于无创性胎儿产前诊断当为良策,这部分胎儿DNA含量相对较多,检测阳性率较高。