饮用水有机提取物对L02细胞增殖周期和凋亡的影响

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【目的】观察饮用水有机提取物对人正常肝细胞(L02)的细胞增殖周期和细胞凋亡的影响。【材料和方法】采集管网末梢水,利用固相萃取法提取饮用水中有机污染物。体外常规培养L02细胞,设5个染毒剂量组,分别为5.0000L/ml、2.5000L/ml、1.2500L/ml、0.6250L/ml和0.3125L/ml,同时设溶剂对照组(0.1%DMSO)和空白对照组(培养液),处理时点为24h,48h,72h。采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法观察L02细胞的增殖情况;流式细胞仪检测细胞周期的构成比和细胞凋亡率。【结果】(1)随染毒剂量的增加,染毒组L02细胞增殖水平越低。处理组与溶剂对照组比较差异均有统计学意义(p<0.05)。随染毒时间的延长,细胞增殖抑制作用增强。(2)细胞周期观察发现;除24h、48h的0.3125L/m1染毒组外,其余各时相染毒组L02细胞中G0/G1期细胞比例均随染毒剂量的增加明显降低(p<0.05)。此外,0.6250L/ml以上剂量组中,S期细胞比例明显增加(p<0.05)。且随染毒时间的延长,其S期细胞比例增多,48h、72h染毒组与24h染毒组比较,差异均有统计学意义(p<0.05)。(3)随着染毒剂量的增加,细胞凋亡率呈上升趋势,染毒72h后,各组细胞凋亡率均明显升高(p<0.05)。而染毒24h、48h后,仅在1.2500 L/ml以上剂量组出现明显升高(p<0.05);染毒时间对细胞凋亡率影响的观察发现:48h、72h染毒组与24h染毒组比较,差异均有统计学意义(p<0.05)。【结论】在本实验条件下,饮用水有机提取物可将L02细胞阻滞于S期,从而抑制其增殖作用,同时增强细胞凋亡的诱导作用,此可能为饮用水有机提取物对L02细胞毒性的分子基础。
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