紫杉醇合成关键酶DBAT基因在灰盖鬼伞中的异源表达研究

来源 :中国菌物学会第五届会员代表大会暨2011年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Rita519
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  10-去乙酰巴卡亭1乙酰转移酶(DBAT)负责将10-去乙酰巴卡亨Ⅲ进行酰基化得到紫杉醇的直接二萜前体巴卡亭Ⅲ.本研究从南方红豆杉(Taxus chinensis var mairei)中克隆出DBAT基因并对其进行生物信息学分析,该基因含有一个1323bp的开放阅读框,编码440个氨基酸残基.将所克隆的DBAT基因遗传转化灰盖鬼伞(Copnnus cinereus)原生质体进行异源表达研究,通过PCR和SDS-PAGE鉴定得到7株灰盖鬼伞拟转化子,共转化率为30.4%;通过高效液相色谱定性试验得到3株稳定生产巴卡亭Ⅲ的灰盖鬼伞工程菌株.灰盖鬼伞作为大型真菌的模式生物,具有原核表达系统不具备的蛋白加工体系和独特的萜类物质代谢池,本研究为日后开展大型真菌中紫杉醇的代谢工程提供的理论基础和技术支持.
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