小鼠精原干细胞体外长期培养体系的建立

来源 :第十三次全国动物遗传育种学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:abcdewwy
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在哺乳类,精原干细胞是成体内唯一可将遗传信息传递给下一代的干细胞,它对生物学、医学和生物技术等方面的研究具有很重要的意义.但国内与之相关的研究甚少,本研究的目的在于寻找一种体外长期培养小鼠精原干细胞的方法.为本实验室更深入地进行精原干细胞方面的研究奠定基础.将经Percoll不连续密度梯度分离的7~8日龄小鼠的精原细胞(纯度为37.02﹪和69.06﹪),接种到两种不同体系中进行培养:A培养体系是以自身的支持细胞为饲养层.补充添加10﹪、10﹪→2.5﹪和2.5﹪三个不同浓度的血清.B培养体系是以小鼠胎儿成纤维细胞为饲养层,补充添加2.5﹪和10﹪的血清.研究结果表明:(1)A体系中,采用10﹪→2.5﹪的血清更适合于精原细胞的体外长期培养.在整个培养过程中都可观察到精原细胞的增殖,并最终可形成集落.(2)B体系中,采用2.5﹪的血清更适合于精原细胞的体外长期培养.精原细胞的增殖能力有限,仅在培养的前3d可见到细胞的明显增殖行为,形成的集落维持4个月左右无明显变化.尽管两体系中精原细胞均可增殖,但二者的增殖行为及形成的集落的形态都不尽相同.
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