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目的：制备携带有人源DPP4基因(hDPP4)的转基因小鼠,为中东呼吸综合征(Middle East Respiratory Syndrome.MERS)冠状病毒疫苗的研制和治病机制分析工作提供小动物模型.
方法：首先从体外培养的人类细胞系中克隆HDPP4cDNA序列,将其插入表达载体后构建重组质粒.随后利用原核注射法制备HDPP4转基因小鼠,繁育出F0代转基因小鼠.选取整合有HDPP4基因的F0代鼠与野生型鼠杂交繁殖获得F1代小鼠.PCR鉴定F1代转基因小鼠基因型,同时用RT-PCR和Western blotting方法检测HDPP4在转基因小鼠全身组织表达情况.
结果：共得到F0鼠4只.F1代转基因小鼠经Westernblotting和RT-PCR检测,HDPP4表达水平在心、肝、脾、肺、脑等组织中表达中均明显增高.
结论：成功构建HDPP4基因小鼠,并且能够稳定遗传.为后续的MERS疫苗评价相关工作奠定了基础.