流行性乙型脑炎病毒E蛋白可溶性原核表达

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十三次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kaishizai2009
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本研究旨在表达出可溶性流行性乙型脑炎E蛋白,为乙脑的诊断提供抗原。根据GenBank上公布的JEV基因序列,设计带酶切位点的特异性引物,通过RT-PCR方法获得E蛋白基因,将其克隆测序后插入pBCX表达载体。PCR筛选和酶切鉴定后,提取阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG(O.5mM)诱导后,取样进行SDS-PAGE电泳和western blot分析。结果显示表达的融合蛋白大小为88kD,表达量占菌体蛋白30[%],且绝大部分为可溶。转膜后用化学发光底物显色,在约88KDa位置出现目的条带,说明抗原性较好。表明己成功地表达出该可溶蛋白。
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