短链软骨多糖分离纯化及对K562细胞增殖抑制作用的研究

来源 :中国食品科学技术学会第九届年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a_hai1983
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  本实验研究了短链软骨多糖对人红白血病K562细胞的增殖抑制作用及对细胞周期分布的影响,从自由基生物学角度来阐明其抑制肿瘤活性的机理.采用碱提一酶解法从猪软骨中分离提取软骨多糖;高效液相色谱法测定软骨多糖的纯度;噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞的增殖活性;用流式细胞仪分析细胞周期;以分光光度法测定超氧阴离子(O2-)的产生,过氧化氢酶(CAT)的活性;试剂盒法测定超氧化物歧化酶(SOD).结果表明:短链软骨多糖能显著抑制K562细胞的增殖,这种抑制作用呈现明显的浓度依赖性;随着多糖作用时间的增加,G0/G1期细胞减少,S期细胞显著增加,G2/M期细胞减少,凋亡细胞所占的比例显著增加,多糖作用48小时后达到22.2%.与对照细胞相比,软骨多糖诱导K562细胞产生的O2-在24h达到高峰,是对照细胞的1.689倍,并且引起胞内SOD性明显变化;但是CAT的变化仅在48h具有显著性差异.结果表明:软骨多糖作用于癌细胞产生高氧化应激,导致DNA被不可逆转的破坏.与基因有关的细胞周期被阻滞,本实验中阻滞了细胞从S期向G2/M期转变,从而抑制了癌细胞增殖.
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