本研究成功构建了pDNAIL-1β及pDNAIL-16分子佐剂,将两种质粒分别或共同与禽流感疫苗联合免疫,观察鸡白细胞介素1β、16分子佐剂对H5亚型禽流感灭活疫苗免疫效果的影响。将1日龄非免疫健康雏鸡100只,分成5组:重组H5亚型禽流感病毒灭活疫苗AI(A组)、AI-pcDNA3.1(B组)、AI-pDNAIL-1β(C组)、AI-pDNAIL-16(D组)、AI-pDNAIL-1β+pDNAIL-16(E组)。采用微量血凝抑制试验法(HI),在免疫后每7d检测禽流感H5特异性抗体,比较各组试验鸡的体液免疫应答水平.实验结果表明:C组、D组、E组都使HI抗体早于A组和B组(免疫后7d)达到保护水平,C组实验中期和后期HI抗体水平显著提高并使其维持在很高的水平,并使HI抗体滴度提高了2log2以上。D组实验前期HI抗体水平迅速提高且显著高于对照组,但在免疫中后期的HI抗体水平与对照组差异不显著.E组HI抗体水平在实验中前期(免疫后14d)即接近峰值,显著高于C组与D组,实验后期一直保持较高水平.表明鸡IL-1β、IL-16分子佐剂能显著提高机体对禽流感H5灭活疫苗的体液免疫水平.用流式细胞仪对CD4+、CD8+及CD3+T细胞亚群进行了监测,实验结果表明:C组、D组及E组实验免疫后外周血中CD4+与CD3+T细胞的百分含量显著提高,各组之间差异不显著.C组、D组和E组的CD8+T细胞水平与对照组A组和B组无显著差异。表明鸡IL-1β、IL-16分子佐剂能显著提高机体CD4+、CD3+T细胞百分含量。本研究为单独使用或联用pDNAIL-1β、pDNAIL-16作为禽流感疫苗分子佐剂提供了科学依据。