【摘 要】
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NF90是一种新型的宿主抗病毒因子,具有调节流感病毒感染细胞的PKR激酶活性的能力,但确切的调控机制尚未阐明.本研究拟通过研究NF90与流感病毒非结构蛋白(NS1)的互作关系以及N
【机 构】
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中国检验检疫科学研究院动物检疫研究所,北京100029
【出 处】
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中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会
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NF90是一种新型的宿主抗病毒因子,具有调节流感病毒感染细胞的PKR激酶活性的能力,但确切的调控机制尚未阐明.本研究拟通过研究NF90与流感病毒非结构蛋白(NS1)的互作关系以及NF90对NS1的功能调节方面探讨NF90的抗病毒作用机制.本研究通过兔疫亲和沉淀结合串联质谱技术筛选和鉴定了NS1的宿主互作蛋白;通过转染与病毒感染实验证明了候选互作分子之一的NF90是NS1的新型靶蛋白;通过突变分析结合免疫沉淀证明了NF90与NS1的互作依赖于NS1的RNA结合特性,并证明NS1通过N端的RNA结合区结合NF90分于的C端RNA结合区,通过兔疫沉淀证明了NS1可以分别结合NF90和PKR,但是NS1的表达可以抑制NF90结合PKR,提示NF90可能参与了NS1抑制PKR磷酸化激活的过程;功能研究表明,siRNA抑制NF90的表达可以促进NS1对PKR磷酸化的抑制作用,过表达外源NF90则可以阻遏NS1转染细胞中NS1对PKR磷酸化的抑制活性,也可以阻遏不同亚型的甲型流感病毒对A549细胞中PKR磷酸化的抑制.本研究表明,NF90通过拮抗流感病毒NS1对PKR磷酸化的抑制作用从而发挥其抗病毒活性.
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