【摘 要】
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目的 探讨多发性骨髓瘤(MM)临床骨髓样本流式荧光抗体CD138 表达伴随染色后样本放置时间延长、短时内显著衰减现象及其发生机制,并寻找解决方法.方法 ①收集MM 患者骨髓,
【机 构】
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四川大学华西医院血液科 成都,610041
【出 处】
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第四届全国血液肿瘤学术大会暨第七届全国淋巴肿瘤诊治进展研讨会
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目的 探讨多发性骨髓瘤(MM)临床骨髓样本流式荧光抗体CD138 表达伴随染色后样本放置时间延长、短时内显著衰减现象及其发生机制,并寻找解决方法.方法 ①收集MM 患者骨髓,经裂红处理后分为两组,实验组标记CD138-PE,对照组标记CD38-APC,18℃染色20 分钟,经PBS 洗2 遍后,分别于0、0.5、1、2、24 时间点用流式细胞仪检测两组表达量及荧光强度；②对MM 细胞株U266 分别进行膜表面和固定打孔胞内两种染色,标记CD138-PE 和CD38-APC 进行流式细胞仪检测；③使用CytoSelect？ 96-Well Phagocytosis Assay 检测U266 细胞株吞噬作用,设置阴性对照组和实验组.结果 ①MM 患者骨髓CD138 表达量：0 h 与0.5 h 无显著变化,与0 h 相比,1、2、24 h 依次减少(34.35±2.95)％、(43.65±1.35)％、(59.75±0.25)％；荧光强度：0 h与0.5 h 无显著变化,与0 h 相比,1、2、24 h 依次减弱(14.75±5.65)％、(30.85±5.85)％、(73.00±7.00)％；而CD38 表达量及荧光强度在这5 个时间点均无显著变化,说明CD138 表达短时衰减并非荧光素猝灭和细胞自身活性的因素.②MM 细胞株U266 的CD138 表达量：膜表达基本全阴(＜1％未标记对照组),胞内表达基本全阳(＞99％未标记对照组),提示CD138 胞内转移.3.MM 细胞株U266 吞噬检测实验组与阴性对照组无显著差异.结论 MM 患者CD138 流式荧光表达量及强度伴随样本放置时间延长而短期内明显减少,0.5h 起尤为显著；该现象为细胞活性、吞噬途径非依赖,可能与特定受体介导内吞有关；4％多聚甲醛固定后检测可能解决该问题.
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