【摘 要】
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目的:针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)包膜糖蛋白gD以及包膜糖蛋白gB的CTL表位,构建重组真核表达质粒pVAX-gD-CTL,为研制HSV-2 DNA疫苗奠定基础. 方法:根据GenBank中HSV-2病
【出 处】
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2006中国中西医结合皮肤性病学术会议
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目的:针对Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-2)包膜糖蛋白gD以及包膜糖蛋白gB的CTL表位,构建重组真核表达质粒pVAX-gD-CTL,为研制HSV-2 DNA疫苗奠定基础.
方法:根据GenBank中HSV-2病毒基因序列分别设计gD上、下游引物,以及gB CTL表位的核苷酸序列,用PCR方法从已构建好的pVAX-gD真核表达质粒中扩增得到gD片段,将其与CTL表位一同克隆到pVAX1载体,构建重组真核表达质粒pVAX-gD-CTL.并以重组质粒转染COS-7细胞,用免疫组织化学和Westernblot方法鉴定重组质粒体外的表达.
结果:经酶切鉴定及DNA序列测定证实重组质粒构建正确,细胞转染实验表明,构建的重组质粒能在COS-7细胞内表达.
结论:成功构建HSV-2 gD蛋白抗原重组真核表达质粒,并能在真核细胞内获得表达.
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