ENGINEERING DNA POLYMERASES FOR APPLICATION IN DNB-BASED SEQUENCING TECHNOLOGY

来源 :第十一届中国酶工程学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jingliang3334
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葡萄糖醛酸是由葡萄糖的伯醇羟基被氧化成羧基所形成的化合物,广泛存在于动植物中,具有重要的生物功能.葡萄糖醛酸中存在高反应活性的醛基和羧基,能结合含有羟基、巯基、羧基、氨基的有毒物质,增强有毒物质的水溶性,使之快速排出肾脏,达到排毒作用.
酶分子稳定性是长久以来人们关注的问题,相比引入二硫键、端部游离氨基酸去除、定点突变、端端序列替换,结合融合简单得多.碳水化合物结合结构域(CBM)是一种无催化活性结构域,源于海栖热袍菌TherrYiotogarYiaritirYia GHlO木聚糖酶的CBM9融合于黑曲霉A.niger GHl1木聚糖酶没有提高稳定性,拆分为较小的结构域Cl/C2融合于C-端,只有C2提高Xyn稳定性,而CI只提高
论文采用不能转运纤维二糖的酿酒酵母YP-βG(表达有粗糙脉孢菌β-葡萄糖苷酶GH1-1)作为出发菌株,将候选的黑曲霉纤维二糖转运蛋白基因在菌株YP-βG中表达,通过检测重组酵母能否在纤维二糖为唯一碳源培养基上正常生长,来判断候选蛋白是否具有转运纤维二糖的能力。
蛋白酶作为一种生物催化剂,在生物体内几乎参与催化所有的物质转化过程,与生命活动密切相关.蛋白酶因其独特的催化能力也被广泛应用于工业生物催化和医疗应用等方面.然而天然存在的蛋白酶的活性,特异性以及稳定性并没有达到工业和医疗应用上的要求,使得蛋白酶的应用受到了极大的限制.
漆酶(EC1.10.3.2)是一类含铜离子的氧化酶,从底物吸收电子并传递给氧气,将氧气还原成水,属于多铜氧化酶家族,在高等植物、真菌、细菌和昆虫中都有发现.漆酶可以催化多种底物,包括邻(对)苯二酚、氮羟基化合物、苯胺和呈现还原性的有(无)机化合物等.
D-氨基酸是合成许多药物、农药及食品添加剂的重要中间体,其中D-缬氨酸广泛存在于杀虫剂、兽药抗生素及药物中,如氟胺氰菊酯、沃尼妙林、青霉胺、放线菌素D、真菌孢肽、缬氨霉素等.此外,在细胞培养基中添加D-缬氨酸,可选择性抑制纤维细胞的增殖.
β-内酰胺类抗生素是目前世界市场上最重要的抗细菌感染药物,年生产量约为3×107kg,年销售额为150亿美元,市场份额为65%.半合成β-内酰胺类抗生素是其中最重要的一类.半合成抗生素一般由两步来合成:通过天然发酵产物的水解,得到了各种β-内酰胺母核;然后,母核与不同的侧链缩合合成了品种繁多的半合成抗生素.
隐色素/光修复酶蛋白家族(cryptochrome/photolyase family,CPF)是一类修复遗传物质损伤以及调控生物体各种生化反应的蛋白,CPF蛋白借助黄素腺嘌呤二核苷酸(Flavin Adenine Dinucleotide,FAD)辅酶吸收光能来执行功能.FAD通过得失一个或是两个电子完成氧化还原反应,通常存在3种基本形式:完全氧化型,自由基型(单电子还原态),完全还原型(双电子
随着现代生活节奏的加快和科技水平的不断提高,人们对身体健康和环境保护的重视程度也越来越高,因此对疾病的生物标志物、毒素、农药残余及病原体等目标小分子的快速和及时检出显得越发重要,而开发新型、低成本、快速准确的小分子体外检测手段也就凸显出其必要性.
模拟酶是通过人工合成出的一类具有天然酶生物特性的催化剂.通过模拟天然酶的活性中心和作用机理使其具备天然酶的一些催化特性.在以往的研究中,人们曾使用蛋白质、多肽指导磷酸铜纳米花的合成,以期模拟出某种酶的活性.