【摘 要】
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本研究利用Tet-on系统构建毛囊特异性的LEF1表达载体，调节和控制LEFT基因在绒山羊胎儿成纤维细胞中的表达，为今后转基因绒山羊新品种的培育提供基础数据。本研究获得了转染pcDNA4-KL表达载体后稳定整合LEF1基因的转基因绒山羊成纤维细胞克隆。己有的研究结果证明，KAP6.1启动子不仅能在毛囊细胞中特异性表达，在成纤维细胞中也有转录和表达活性。本研究经过筛选和诱导表达试验，初步证明了四环素
【机 构】
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内蒙古大学国家动物转基因技术研究中心 呼和浩特010070
【出 处】
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第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会
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本研究利用Tet-on系统构建毛囊特异性的LEF1表达载体，调节和控制LEFT基因在绒山羊胎儿成纤维细胞中的表达，为今后转基因绒山羊新品种的培育提供基础数据。本研究获得了转染pcDNA4-KL表达载体后稳定整合LEF1基因的转基因绒山羊成纤维细胞克隆。己有的研究结果证明，KAP6.1启动子不仅能在毛囊细胞中特异性表达，在成纤维细胞中也有转录和表达活性。本研究经过筛选和诱导表达试验，初步证明了四环素适当浓度诱导下，在mRNA水平可检测到目的基因LEFT的转录条带。有关其蛋白质水平的表达检测目前正在进行中。
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利用显微操作技术进行的动物体细胞核移植方法不仅是研究胚胎重编程机理、转基因工程的常规手段之一,也是地方物种保护,培育新系家畜提供了重要的实验技术平台.现在世界范围内普遍存在核移植效率低下等问题,为了优化并建立适合广西德宝黑猪体细胞核移植体系,本研究探讨了不同的融合和电激活的参数,化学激活药剂,融合激活方案,供体等因素对核移植效率的影响,并探讨了重构胚培养中添加适宜浓度和处理时间的抗氧化剂Vitam
本实验采用来源于南宁市屠宰场收集的猪卵巢的卵母细胞，于25350C生理盐水送至实验室，用带有18G针头的注射器抽取卵泡直径为3～6mm的卵泡，经沉淀后收集有3层颗粒细胞包被的卵丘卵母细胞复合体，于成熟液中经体外成熟42-44h后，收集有第一极体的成熟卵母细胞用于实验。供体细胞选用两周龄广西纯种德保黑猪第5～8代耳成纤维细胞。本实验采用四组对照实验不同浓度的5-Aza-CdR处理广西纯种德保黑猪耳成
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