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目的:探讨不同时间窗的高压氧(HBO)治疗对脊髓损伤(SCI)大鼠神经功能保护及抑制神经细胞凋亡的影响,从而对时间窗进行优化选择。
方法:将120只健康、封闭群SD大鼠随机分为假手术组、SCI组、HBO治疗组(含HBO-2h、HBO-8h、HBO-12h、HBO-24h、HBO-48h、HBO-72h、HBO-1W和HBO-2W共8个亚组,分别在相应时间点开始HBO治疗).大鼠脊髓不完全损伤模型采用改良Aliens打击法建立.接受7次HBO治疗后,采用动物神经运动功能BBB评分评价大鼠SCI的恢复程度;采用实时荧光定量PCR方法检测基因Bak、Bcl-2、Casp3、TNFR2、C-fos和NOS2基因mRNA的相对表达量;采用免疫组化方法检测基因Bak、Bcl-2、Casp3、TNFR2、C-fos和NOS2基因蛋白的表达量变化。
结果:1.与SCI组相比,假手术组和HBO-12H组BBB评分值非常显著(P＜0.01),HBO-48H组和HBO-72H组BBB评分值显著(P＜0.05);2.与假手术组相比,SCI组中Bcl-2的mRNA相对表达量无显著变化,SCI组中Bak、Casp3和C-fos的mRNA相对表达量显著上调(P＜0.01),SCI组中TNFR2和NOS2的mRNA相对表达量显著上调(P＜0.05);与SCI组相比,Casp3、TNFR2、C-fos和NOS2在HBO-48H组mRNA表达量显著下调(P＜0.05); bak基因分别在HBO-12H组、HBO-48H组mRNA表达量显著下调(P＜0.05);3.免疫组化实验表明,Bak基因的蛋白表达水平在HBO-12H组、HBO-48H组有明显减少;Casp3、TNFR2、C-fos和NOS2基因的蛋白表达水平在HBO-48H组有明显减少。
结论:综合大鼠BBB运动能力评分及Bak、Bcl-2、Casp3、TNFR2、C-fos、NOS2基因的mRNA和蛋白表达量的变化,在SCI后12H和48H进行HBO治疗效果明显,其中48H最佳。