双氯芬酸钠相关IEC-6细胞损伤模型中RAS的表达

来源 :第八届浙江国际消化病学术大会暨美国胃肠病协会第二届中国学术论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenyanzhao12
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  目的:构建双氯芬酸钠相关大鼠小肠隐窝上皮细胞株(IEC-6)损伤模型,观察RAS中ACE2、Ang Ⅱ、Ang(1-7)及Mas受体的表达及变化,明确其表达于IEC-6细胞中,探索NSAIDs相关小肠损伤的可能机制.方法:用不同浓度及时间梯度双氯芬酸钠干预IEC-6细胞株,采用CCK8法、FCM法等确定双氯芬酸钠干预的合适浓度及时间,构建双氯芬酸钠相关大鼠小肠上皮细胞损伤模型.研究分为空白对照组:不予任何干预,模型组:采用800 μ M双氯芬酸钠干预24小时.透射电镜观察细胞超微结构改变.RT-qPCR检测ACE2-mRNA、Ang Ⅱ-mRNA及Mas-mRNA表达;Western Blot检测ACE2、AngⅡ、Mas及p-p38MAPK蛋白表达;免疫荧光定位细胞中Ang (1-7)表达;ELISA法检测细胞上清液中Ang(1-7)水平.
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