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HM-3是本课题组自主研究开发的一种新型整合素阻断多肽,国内外文献检索查新表明HM-3是新的氨基酸序列,已经获得国家发明专利授权,可以开发成一类抗肿瘤新药。HM-3在具有显著的抗肿瘤活性的同时,也具有血浆清除率高、体内半衰期短(30min左右),容易被体内蛋白酶降解,动物体内活性评价中给药频率高等问题,为解决上述问题,以聚乙二醇修饰后的mPEG-SC20k-HM-3在保留极显著抗肿瘤活性的同时,还具有了体内半衰期显著延长(20h左右)、稳定性明显提高,给药频率由原来的一天给药两次延长至两天给药一次,免疫毒性降低的特点。mPEG-SC20k-HM-3可以开发成又一创新抗肿瘤药物,目前正在进行系统的临床前研究和开发。而体内外药效学研究是新药开发的重要环节,本课题即是按照《细胞毒类抗肿瘤药物非临床研究技术指导原则》的要求对mPEG-SC20k-HM-3的体内外活性进行了测定。体外开展了mPEG-SC20k-HM-3以下活性检测:血管生成抑制模型的实验,包括Matrigel成管实验和大鼠动脉环实验;细胞水平上包括HUVEC内皮细胞迁移实验和MGC803细胞侵袭实验,以上实验阳性药均为Avastin。1)Matrigel实验:通过建立Matrigel法评价mPEG-SC20k-HM-3的抑制人脐静脉内皮细胞(HUVECs)体外构建新生血管的活性。结果表明,6h时的抑制率中120μg/ml的抑制效果最好,为76.34%。2)大鼠动脉环实验:将大鼠动脉段包埋于纤维蛋白胶中,用DMEM无血清培养液进行体外培养,内皮细胞从动脉段切口处向外生长,形成具有分枝的微血管样结构。计数微血管生成量,绘制生长曲线。结果表明,100μg/ml给药组的抑制率最高,达到了58.9%。3)HUVEC内皮细胞迁移实验:通过建立HUVEC内皮细胞迁移模型,评价药物抑制内皮细胞迁移的活性。结果表明,100μg/ml给药组的抑制率最高,达到了65.8%。4)MGC803细胞侵袭实验:评价药物抑制MGC803细胞侵袭的活性。结果表明,100μg/ml给药组的抑制率最高,达到了50.4%。体内实验检测mPEG-SC20k-HM-3抗肿瘤活性:通过建立人非小细胞肺癌H460的裸鼠移植瘤模型,Avastin为阳性对照药,评价mPEG-SC20k-HM-3抗肿瘤活性。结果显示,mPEG-SC20k-HM-3皮下注射高、中剂量和mPEG-SC20k-HM-3静脉注射高剂量均具有较显著的抑制作用,对裸鼠移植瘤的瘤重抑制率分别为74.59%、54.42%、73.89%。以上体内外抗肿瘤活性结果表明,mPEG-SC20k-HM-3有望开发成新型的抗肿瘤新药,目前正在开展系统的临床前研究:包括药学、药理、毒理研究,有望在不久的将来申报临床研究。