【摘 要】
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目的 内质网应激介导的细胞凋亡在各种疾病中起着非常重要的作用,其中包括脊髓损伤(SCI).研究表明神经生长因子(NGF)具有神经保护作用,可以促进脊髓损伤恢复,但是其具体
【机 构】
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温州医科大学附属慈溪人民医院,浙江慈溪315300温州医科大学药学院,浙江温州325035
【出 处】
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第十六届全国神经精神药理学学术会议
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目的 内质网应激介导的细胞凋亡在各种疾病中起着非常重要的作用,其中包括脊髓损伤(SCI).研究表明神经生长因子(NGF)具有神经保护作用,可以促进脊髓损伤恢复,但是其具体机制尚不明确.方法 手术暴露成年雌性SD大鼠脊柱,用血管夹夹闭大鼠T9段制作轻度挫伤模型.0.9％生理盐水稀释神经生长因子原液,并尾静脉注射20 μg· kg-1·d-1给药,直到1,3,7和14d处死.采用BBB评分、斜扳试验、脚步印迹等行为学检测方法分析脊髓损伤大鼠后肢运动功能变化.此外,应用Western blot检测体内外内质网应激相关蛋白CHOP、GRP78及胱天蛋白酶12的表达水平.体内用TUNEL凋亡试剂盒检测细胞凋亡率,体外水平采用流式细胞仪检测细胞凋亡水平,同时用相关抑制剂分析下游信号通路Akt/GSK-3β和ERK1/2的变化.结果 实验结果显示大鼠脊髓损伤后有内质网应激介导的细胞凋亡的发生,神经生长因子给药可以促进大鼠运动功能的恢复,增加脊髓损伤区域神经元细胞的存活.用TUNEL检测显示,神经生长因子抑制神经元细胞的凋亡及胱天蛋白酶3凋亡因子的表达,抑制内质网应激介导的凋亡反应蛋白CHOP、GRP78及胱天蛋白酶12的表达,同时神经生长因子增加生长相关蛋白GAP43的表达.体外检测发现,给予NGF后下游信号通路Akt/GSK-3β和ERK1/2被激活.结论 大鼠脊髓损伤后,神经生长因子的神经保护作用与激活下游信号通路,抑制内质网应激介导的细胞凋亡有关,从而为神经生长因子通过调节慢性内质网应激,治疗中枢神经系统性疾病药物开发提供依据.
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