分离鉴定银杏雌、雄花芽差异表达基因的新方法-抑制差减杂交(SSH)

来源 :第三届中国林业学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tonyyuhua
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银杏是珍贵的雌雄异株多用途树种,集药、食、材、赏、护、研于一身,已广泛深入人们的生活.其雌株和雄株具不同的价值及用途,目前无法对苗期银杏进行性别鉴定,极大制约了银杏生产的发展.抑制性差减杂交技术(SSH)是一种高效分离差异表达基因的方法,由于该技术稳定、高效、可靠等优点,目前在植物学研究的各个领域得到了广泛的应用.为获得银杏性别决定相关基因,揭示雌雄异株植物性别决定的分子机制,本研究分别以银杏雌、雄花芽为试材,首次通过抑制性差减杂交技术成功构建银杏雌、雄花芽差减cDNA文库.在双向库中分别随机挑取24个阳性克隆,提取质粒进行测序,共获得34条EST序列.利用NCBI中的BLAST工具比对和功能分析,19条雌花芽EST序列和15条雄花芽EST序列找到了同源基因.功能注释结果显示,雌花芽EST序列中有4个参与了光合作用,而雄花芽EST序列中未发现该类基因;5个雄花芽EST序列可能与能量代谢有关,而雌花芽EST序列中不包含这类基因;在雄花芽EST序列鉴定到一个异胡豆苷合成酶(Strictosidine synthase)相关基因,可能参与了银杏性别决定或花器官发育过程.
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