【摘 要】
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本研究采用分泌型真核表达载体VR1020(以pUC18为骨架，具有CMVIE基因的启动子、增强子、内含子A序列、TPA信号肽序列和BGH转录终止序列及poly(A)信号，卡那霉素抗性)和真核表达载体pVA×1(通过FDA认证，卡那霉素抗性)构建禽传染性支气管炎病毒(IBV)肾型SAIBk分离株的S1、M和N基因的真核表达质粒。根据禽传染性支气管炎病毒(IBV)本课题组分离株SAIBK的全基因组序列
【机 构】
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四川大学生命科学学院，四川大学动物疾病防控生物工程研究中心，四川成都 610064 四川农业大学动物医学院四川雅安 625014
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本研究采用分泌型真核表达载体VR1020(以pUC18为骨架，具有CMVIE基因的启动子、增强子、内含子A序列、TPA信号肽序列和BGH转录终止序列及poly(A)信号，卡那霉素抗性)和真核表达载体pVA×1(通过FDA认证，卡那霉素抗性)构建禽传染性支气管炎病毒(IBV)肾型SAIBk分离株的S1、M和N基因的真核表达质粒。
根据禽传染性支气管炎病毒(IBV)本课题组分离株SAIBK的全基因组序列(D0288927)和vR1020及pvA×1的多克隆位点设计合成用于扩增S1、M和N基因的六对引物，加上相应的酶切位点。其中，N基因上的第375bp处有一BglⅡ酶切位点，为方便载体VRl020(多克隆位点为：BamHI和Bg/Ⅱ)的克隆，设计并合成一对定点突变引物。
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目的：探讨微创方法提高病灶内药物浓度治疗脊柱结核的适应症和疗效.方法：2002年1月-2007年12月间收治应用微创方法和外科方法治疗脊柱结核患者210例.分为三种治疗方法,单纯微创治疗(A)组166例(占79.05％),其中20例有脊髓神经损伤;微创手术的方法是在CT引导下,在原发病灶和流注脓肿内放置注药管和/或双腔灌注冲洗管,然后定期或者持续给药的临床治疗方法.开放手术联合微创治疗(B)组35
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