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为了获得芽孢杆菌源纤维素酶基因,以用于构建相关的高效表达载体,从而能够得到高活性的纤维素酶.本研究根据GenBank中已报道的芽孢杆菌的纤维素酶设计一对特异性引物,对芽孢杆菌基因组DNA进行PCR扩增,将克隆到的产纤维素酶的目的基因片段切胶回收后,与pMD 18-T载体在16℃连接12小时,并转入制备好的大肠杆菌DH5α感受态细胞,然后在含有(X-Gal/IPTG/Amp)的LB培养基上37℃培养过夜(12～14h)后,在LB培养基上筛选出白色菌落,并接种于5mL LB培养基(含有氨苄青霉素)中,37℃振荡培养18h后,再用试剂盒进行重组质粒的提取,经过重组质粒PCR鉴定后进行测序,并对测序结果进行序列分析和同源性比较.结果表明从实验室保存的30多株产纤维素酶的芽孢杆菌中筛选出的一株菌B.LXX 12,PCR扩增出一个大小约1500bp的片段,测序结果也证明该扩增产物是一个包含完整ORF框的基因,同源性比较结果表明与枯草芽孢杆菌源的纤维素酶基因的同源性为98.9％.本研究关于芽孢杆菌纤维素酶基因的克隆及序列分析,对高产的纤维素酶具有重要的指导意义,纤维素酶在农业、工业、食品、畜牧业等各个领域都有巨大的用途,具有广阔的发展前景.本研究意在用分子生物学的方法克隆出纤维素酶基因,测序分析,为进一步实现纤维素酶的高效表达奠定基础.