【摘 要】
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病毒识别受体是病毒感染的第一步,决定着病毒感染细胞的类型和宿主嗜性.FMDV通过识别RGD位点结合整联蛋白受体(αvβ1、αvβ3、αvβ6和αvβ8).整联蛋白αvβ3在许多信号转导、细胞凋亡和肿瘤血管生成中起到重要作用.为了深入研究整联蛋白αvβ3的功能和作用,用高效慢病毒介导的基因转导技术,构建了稳定表达αvβ3异二聚体的CHO-677细胞系,用PCR和IFA分别从基因和蛋白水平检测了αv和
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病毒识别受体是病毒感染的第一步,决定着病毒感染细胞的类型和宿主嗜性.FMDV通过识别RGD位点结合整联蛋白受体(αvβ1、αvβ3、αvβ6和αvβ8).整联蛋白αvβ3在许多信号转导、细胞凋亡和肿瘤血管生成中起到重要作用.为了深入研究整联蛋白αvβ3的功能和作用,用高效慢病毒介导的基因转导技术,构建了稳定表达αvβ3异二聚体的CHO-677细胞系,用PCR和IFA分别从基因和蛋白水平检测了αv和β3亚基的表达,表明该基因已经成功的导入CHO-677细胞并稳定表达.O/ZK/93型口蹄疫病毒感染细胞系之后,为了评价该细胞系对口蹄疫病毒易感性,用饰斑实验、TCID50、实时荧光定量和间接免疫荧光实验比较分析口蹄疫病毒在细胞系和亲本细胞上的生物学特性差异,结果表明感染FMDV/O/ZK/93之后,与亲本细胞相比,CHO-677-mαvβ3细胞系上病毒RNA水平和蛋白表达量显著提高.本研究成功构建了稳定表达αvβ3的细胞系,并可增加对口蹄疫病毒的易感性.该细胞系为深入研究整联蛋白αvβ3做好了铺垫,并可作为研究口蹄疫病毒良好的细胞模型.
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自噬是真核细胞的一种"自食"现象，细胞通过自噬降解变性蛋白质及核酸等生物大分子，对维持细胞稳态具有重要作用。目前在鸡球虫基因组数据库中已发现11种自噬相关基因，提示鸡球虫具有真核细胞保守的自噬现象，但自噬对于虫体活性的影响研究尚无突破性进展。本课题组在前期研究中成功获得多个鸡球虫自噬相关蛋白，发现饥饿条件下子孢子自噬相关基因高水平表达，间接证实自噬对子孢子活性的作用。本研究拟以柔嫩艾美耳球虫子孢子
鸡球虫病是由艾美耳球虫引起的一种严重危害养鸡业的重大疾病。艾美耳球虫的生活史在顶复门原虫中最简单直接，包括裂殖生殖、配子生殖和孢子生殖三个阶段。鸡球虫的裂殖生殖一般是3代。毒害艾美耳球虫的第一、二代裂殖生殖发生在小肠黏膜上皮细胞内，第三代裂殖生殖和配子生殖发生在盲肠黏膜上皮细胞内，易于鉴别分离。艾美耳球虫发育史中，除了未孢子化卵囊，其余发育阶段均为单倍体，其性别的分化和发育可能取决于最后一代裂殖子
日本血吸虫是严重危害人畜健康的重要寄生虫，其在宿主体内的生长发育及繁殖都对宿主造成严重危害。据报道，丝/苏氨酸蛋白磷酸酶1 (PP1)在细胞周期的调节，精子生成等生长发育及生殖相关的生物过程中发挥重要作用。本研究以日本血吸虫为研究对象，通过分子生物学技术鉴定PP1家族成员基因，并利用RNAi技术研究其在日本血吸虫生长发育中的功能。本研究鉴定出三个日本血吸虫PP1家族基因，其在不同发育阶段虫体内均有
将禽白血病(AL)两个亚群克隆化病毒(J：rNX0101和K：rJS11C1)分别与柔嫩艾美尔球虫(E.tenella)共感染SPF鸡,通过死亡率、生长抑制、免疫抑制、病理变化、卵囊排出以及病毒清除率等评价对宿主致病性,进一步通过肠道菌群宏基因组学和脾脏蛋白组学技术阐述共感染致病的分子机制.结果 显示,成功构建ALV分离株JS11C1的传染性克隆,全序列比较显示它可能属于ALV新亚群.不同亚群AL
血吸虫病依然是一种危害人类健康的重要寄生虫病,全世界约有2亿人感染血吸虫。我国是日本血吸虫病流行的主要国家。童虫和成虫是日本血吸虫的两个重要生活阶段,虫体排泄分泌蛋白在免疫逃避中发挥重要作用。本研究通过iTRAQ和液质联用技术,完成了日本血吸虫14天童虫和42天成虫排泄分泌蛋白的比较分析,最终鉴定到298种差异蛋白。其中,童虫高表达蛋白有161个,生物信息学分析显示这些蛋白主要参与抗应激、碳水化合
丝氨酸蛋白酶抑制剂(SPI)在维持组织内环境稳态,促进细胞的存活以及维持宿主防御过程中起到重要作用.到目前为止,已经在多种组织,如动物、植物、细菌、病毒以及寄生虫体内,鉴定出多种SPIs.本研究中,我们从旋毛虫体内鉴定出两种SPIs,分别为Tsp03044和TspAd5.我们通过原核表达系统高效表达了这两种重组蛋白.序列分析结果显示Tsp03044和TspAd5分别属于TIL和serpin超家族,
旋毛虫病是一种再度肆虐的疾病,是由旋毛虫感染引起.在此研究中研究了旋毛虫组织蛋白酶F (TsCF1),将TsCF1进行克隆表达并研究其生物学特性.序列分析表明TsCF1编码366aa,在组织蛋白酶的前体中存在组织蛋白酶F特异性的基序ERFNAQ样基序KLFNAQ序列,同源序列分析表明TsCF1与其余的蠕虫组织蛋白酶F序列具有高于40％的序列一致性,并且系统进化分析表明TsCF1与吸虫组织蛋白酶Fs
为系统研究中国家禽衣原体的流行率和多样性,本项目采集了全国24个地区活禽市场健康禽类(鸡、鸭、鹅和鸽子)的咽拭子和泄殖腔拭子样品,用于衣原体23S rRNA基因的FRET-PCR检测,结合高熔解曲线分析和进一步的测序鉴定衣原体种类.结果 表明,衣原体的总阳性率为26.2％ (602/2,300),本研究在世界范围内首次于禽类报道猪衣原体和鼠衣原体.家禽衣原体是主要的流行种类,占阳性家禽的63.8％
本课题组前期成功克隆了贝氏隐孢子虫(C.Bailey) Rhomboid基因,构建了真核表达载体pEGFP-CbROM,其能够在HEK293细胞中表达.本研究利用已构建好的重组质粒pEGFP-CbROM免疫雏鸡,观察其对动物体诱导产生的免疫应答反应,经口接种贝氏隐孢子虫卵囊进行人工感染,评价该质粒对贝氏隐孢子虫感染的免疫保护效果.结果 表明,与不免疫不感染组、不免疫感染组和pEGFP空质粒免疫组相
为摸清内蒙古主要牧区放牧绵羊胃肠道线虫的流行状况及主要线虫耐药性情况，课题组在呼伦贝尔和锡林郭勒牧场进行了相关研究.粪便虫卵检测结果显示：两个地区放牧绵羊寄生虫在第二季度平均感染率均最高，分别为91.3％和83.2％；平均最低感染率发生的时间则有所不同，呼伦贝尔地区在第四季度最低为29.3％，而锡林郭勒地区却在第三季度达到最低的52.1％，在第四季度略有升高，为53.7％.对锡林郭勒地区绵羊剖解结