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@@毕赤酵母(Pichia pastoris)是表达外源蛋白质,特别是真核来源的外源蛋白质的优良宿主菌。目前已有多种商业化的胞内型及胞外分泌型毕赤酵母表达系统。表面展示技术可以将要表达蛋白质分子锚定于细胞表面,是研究蛋白质一蛋白质相互作用以及酶固定化的有效手段,但毕赤酵母表面展示系统有待进一步开发。米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)脂肪酶RML是一种用途丰富的生物催化剂,除了可用于脂肪水解外,还在酩类合成、转酷反应、手性药物拆分等方面有广泛用途。本研究对实验室已构建的基于絮凝素f1o1pN端锚定的表面展示RML毕赤酵母表达载体pKFS进行进步改造,以期获得RML或其它酶展示效果更佳的毕赤酵母表面展示表达载体。