【摘 要】
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细胞的迁移和浸润是肿瘤恶性程度的标志之一.Rho GTPases蛋白家族作为细胞极化和迁移的枢纽分子,参与调节细胞运动的全过程;非肌肉肌球蛋白Ⅱ(non-muscle myosin Ⅱ,NM Ⅱ)是
【机 构】
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北京师范大学抗性基因资源与分子发育北京市重点实验室;细胞增殖与调控生物学教育部重点实验室,北京100875
【出 处】
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北京细胞生物学会第四次会员代表大会暨2014年年会
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细胞的迁移和浸润是肿瘤恶性程度的标志之一.Rho GTPases蛋白家族作为细胞极化和迁移的枢纽分子,参与调节细胞运动的全过程;非肌肉肌球蛋白Ⅱ(non-muscle myosin Ⅱ,NM Ⅱ)是肌球蛋白家族中的一员,在细胞极化、粘附和迁移方面发挥作用.CrpF46是我实验室新发现的一种中心体蛋白.前期的研究表明:CrpF46基因抑制导致细胞中多中心体、多纺锤体极、多核、多极分裂等现象发生.我们通过双向电泳实验证明,CrpF46低表达时,RhoA、β-tubulin、β-catenin、c-myc等蛋白表达量升高,MBP-1、Peroxiredoxin6等蛋白表达量下降.通过免疫共沉淀实验,从HeLa细胞中钓取与CrpF46相互作用的蛋白非肌性肌球蛋白重链9 (NMHC Ⅱ A),体外pull down实验也验证了这一结论.由于CrpF46的异常表达(包括过表达和低表达),细胞对划痕(Wound healing)的愈合能力显著降低.此外,CrpF46异常表达的细胞株其运动方向和中心体位置发生混乱:当CrpF46过表达的时候,细胞骨架较正常的HeLa明显减少,只延伸出来的伪足范围小;CrpF46低表达时,细胞的骨架的范围比较广,但是细胞骨架的方向性差;CrpF46异常表达时,中心体发生位置异常的百分比要显著高于正常的HeLa细胞的百分比.综上所述, CrpF46结合至NMHC Ⅱ A影响在RhoA--NMHC Ⅱ A作用通路调控中,同时NMHC Ⅱ A借下游因子(如actin、α-tubulin等)调控,使得细胞形态异常,细胞运动方向出现无序的状态.
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