【摘 要】
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本研究对鹅源新城疫病毒(NDV)JG97株的融合蛋白(F)基因进行了扩增、克隆和序列分析。根据GenBank中公开的NDV基因序列合成了一对引物,通过RT-PCR扩增出了JG97株的F基因。将扩增片段克隆到pGEM-T载体中,并进行了序列测定和分析。结果表明,该片段含一个完整的、长1662bp的F基因开放阅读框(ORF),编码的F蛋白长553个氨基酸,其中含有12个半胱氨酸残基和6个潜在的糖基化位
【机 构】
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中国农业科学院家禽研究所,江苏扬州 225003 扬州市畜牧兽医站,江苏扬州 225009
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本研究对鹅源新城疫病毒(NDV)JG97株的融合蛋白(F)基因进行了扩增、克隆和序列分析。根据GenBank中公开的NDV基因序列合成了一对引物,通过RT-PCR扩增出了JG97株的F基因。将扩增片段克隆到pGEM-T载体中,并进行了序列测定和分析。结果表明,该片段含一个完整的、长1662bp的F基因开放阅读框(ORF),编码的F蛋白长553个氨基酸,其中含有12个半胱氨酸残基和6个潜在的糖基化位点,其裂解位点的氨基酸顺序为R-R-Q-K-R-F117,与NDV强毒株特征相符。与13个参考毒株的F基因同源性分析结果表明,JG97株与LZ-NDV、NA-1、SF02、Taiwan95和YG97株的核苷酸和蛋白氨基酸的同源性分别为94.6％～99.6％和96.6％～99.5％,与La Sota株的核苷酸和氨基酸的同源性仅为84.6％和88.8％。结果表明JG97株与LZ-NDV、NA-1、SF02、Taiwan95和YG97等5个毒株的遗传关系较近,而与La Sota株差异较大。
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为进一步研究鸵鸟的防御素基因的功能和生物学活性。参照克隆得到的鸵鸟防御素cDNA片段,通过选用大肠杆菌偏好密码子对鸵鸟防御素基因进行改造,人工合成鸵鸟防御素基因,将成熟肽序列重组到表达载体pGEX-4T-1中,构建重组表达载体pGEX-4T-1-Defensin,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,从而采用在大肠杆菌中表达外源蛋白的方法,进行了鸵鸟防御素原核表达的研究。结果表明重组蛋白经变性复
运用RT-PCR法从五龙鹅的总RNA中克隆了IGF-1基因的cDNA序列(Gen-Bank登录号:DQ662932),克隆了表达IGF-1基因的IGF-Im序列,然后进行原核表达,并用实时荧光定量PCR技术检测了IGF-1基因在五龙鹅10种组织中的表达情况。分析结果如下:五龙鹅IGF-1基因的编码区长462bp,与鸭和鸡基因序列同源性分别为99.6％和98.1％,IGF-1分子空间结构由3个α-螺
黑素皮质素受体1(MC1R)基因是控制动物黑色素合成的重要基因。本文通过研究MC1R基因差异对番鸭羽毛颜色的影响,从分子角度初步探讨禽类黑色素沉积的分子机理。本实验对中国白羽番鸭和黑羽番鸭(各两只)进行克隆测序。结果表明:[1]MCIR基因氨基酸突变(Lys92Glu,Arg217Cys,Thr227Ala)与番鸭羽色有关；[2]构建禽类系统发生树研究发现,雪雁、皇雁和番鸭聚为一类；家鸡聚为一类,
本文旨在获得鸭A-FABP基因序列并进行序列分析,揭示该基因的组织特异性表达规律。运用RT-PCR技术获得鸭A-FABP基因序列,并用半定量RT-PCR方法研究该基因的组织特异表达规律。从35周龄母鸭脂肪组织中首次克隆了A-FABP基因的cD-NA序列,长度为422bp,包含了一个399 bp的完整CDS,编码132个氨基酸。该序列与鹅、鸡的A-FABP基因序列约有94％的同源性,而相应氨基酸序列
肌细胞生成素是生肌调节因子MRFs(MyoD、MyoG、Myf5和MRF4)家族的一员,具有控制成肌细胞融合的起始、促使成肌细胞增殖以及使单核成肌细胞转变成为多核的肌纤维等作用,在MyoD家族中具有中心地位。以鸡MyoG基因的内舍子为研究对象,根据鸡MyoG基因组序列以及mRNA序列信息,针对结构不明确的第二内含子区域设计上下游引物,采用PCR方法,首次成功克隆出鸡MyoG基因内含子Ⅱ,并进行序列
△6-脂肪酸脱氢酶是生成一系列不饱和脂肪酸的限速酶。根据GenBank上公布的预测鸡△6-脂肪酸脱氢酶基因序列XM421053设计引物进行RT-PCR,获得一个1323bp的cDNA片段。将所得到的片段同鹌鹑、普通牛、猕猴、猩猩等的△6-脂肪酸脱氢酶基因核苷酸序列进行同源性比较,同源性分别为94.69％、76.11％、75.28％、74.83％,氨基酸序列同源性分别为93.37％、78.78％、7
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本文旨在研究有效的疫苗免疫增强佐剂以预防和治疗鸡免疫失败病。设计引物扩增、克隆鸡白细胞介素-6(ChIL-6)成熟肽基因并进行原核表达,对表达的融合重组蛋白(rChIL-6)进行纯化,通过测定rChIL-6的促小鼠脾脏淋巴母细胞增殖活性来评估蛋白的生物学活性；将120只SPF鸡平均分成12组,分别接种NDV活疫苗、AIVH5N1灭活疫苗以及NDV、AIV疫苗与4个不同浓度的rChIL-6蛋白佐剂同