【摘 要】
:
目的 探讨硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)是否可以通过上调SIRT1拮抗同型半胱氨酸诱导HT22细胞衰老.方法 Cell counting Kit-8 (CCK8)法检测细胞的活性;β-半乳糖苷酶染色法(Senescence Associated acidic-β-Galactosidase SA-β-Gal)、台盼蓝计数求细胞生长曲线及Western Blotting检测细胞衰
【机 构】
:
南华大学生理学教研室;南华大学附属第二医院神经内科 南华大学附属第二医院神经内科
【出 处】
:
湖南省生理科学会2015年度学术年会暨第十届理事会换届选举大会
论文部分内容阅读
目的 探讨硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)是否可以通过上调SIRT1拮抗同型半胱氨酸诱导HT22细胞衰老.方法 Cell counting Kit-8 (CCK8)法检测细胞的活性;β-半乳糖苷酶染色法(Senescence Associated acidic-β-Galactosidase SA-β-Gal)、台盼蓝计数求细胞生长曲线及Western Blotting检测细胞衰老相关蛋白P16INK4a、P21CIPL蛋白的表达评价HT22细胞衰老;Western Blotting检测沉默信息调节因子1(Silent mating type information regulation homolog 1,SIRT1)蛋白的表达;罗丹明123 (Rh123)染色荧光显微镜照相检测细胞线粒体膜电位;Annexin V/PI染色流式细胞仪和Hoechst33258染色检测细胞凋亡.结果 1.Hcy (2.5、5、10 mmol/L)处理HT22细胞48h后,SA-β-Gal阳性细胞明显增加,衰老负性调控蛋白P16INK4a、P21CIPL蛋白表达明显上调,细胞生长曲线明显呈下降趋势,表明Hcy能诱导HT22细胞衰老.2.NaHS (H2S供体,100、200、400 μ mol/L)可呈浓度依赖性地抑制Hcy(5mmol/L,48 h)诱导HT22细胞SA-β-Gal染色阳性细胞增加,P16INK4a、P21CIPL蛋白表达上调及细胞生长曲线下降趋势,表明H2S可拮抗Hcy诱导HT22细胞衰老.3.Hcy (2.5、5、10 mmol/L)处理HT22细胞48小时后,细胞SIRT1蛋白的表达呈浓度依赖性下调,表明Hcy可抑制HT22细胞SIRT1蛋白的表达.4.NaHS (100、200、400 μ mol/L,48h)可浓度依赖性地上调HT22细胞SIRT1蛋白的表达,而且可逆转Hcy(5 mmol/L)处理HT22细胞后SIRT1蛋白表达的下调作用,表明H2S可上调HT22细胞SIRT1的表达.5.SIRT1抑制剂Sirtinol (15 μmol/L)可逆转NaHS (400 μmol/L)对Hcy(5mmol/L,48 h)增加HT22细胞中SA-β-Gal染色阳性细胞比例、上调衰老相关关键蛋白P16INK4a、P21CIPL蛋白表达以及促进细胞生长曲线下降趋势的阻断作用,表明SIRT1对H2S抑制Hcy诱导HT22细胞衰老具有介导作用.结论 H2S通过上调SIRT1拮抗Hcy诱导HT22细胞衰老.
其他文献
Objective To evaluate the importance and feasibility of the first-trimester diagnosis and management of Cesarean scar pregnancies (CSP) after in vitro fertilization-embryo transfer (IVF-ET).Methods Al
Objective To investigate effects of the different proportions combinations of astragalus and angelica on bone marrow hematopoiesis suppression induced by Cyclophosphamide (CTX) in mice, to analysis th
Objective Experimental autoimmune neuritis (EAN) is an animal model for human Guillain-Barre syndrome (GBS).Recent studies had shown that autophagy was involved in peripheral nervous system disease.Ho
目的 Apelin是1998年发现的血管紧张素受体AT1相关受体蛋白(ApJ)的天然配体.近来,有研究表明apelin-13参与学习记忆过程.巴甫洛夫恐惧条件化是研究情绪学习记忆的一种经典的动物模型.有研究表明恐惧条件化获得缺陷可能是精神分裂症患者情感钝化的原因;另外,恐惧记忆长时程留存是创伤后应激障碍(PTSD)的典型特征,因而探究Apelin-13信号通路在条件化恐惧记忆中的作用机制对精神分裂
目的 硫化氢被认为是第三种气体信号分子,在神经系统中扮演重要的角色。脑内合成硫化氢的主要酶为胱硫醚-β-合成酶(CBS),因此研究CBS与神经系统疾病的关系具有重要意义。利用基因重组技术,构建CBS基因过表达载体,转染PC12细胞,建立CBS过表达的PC12细胞株并进行鉴定。方法 根据Gene bank提供的CBS cDNA序列设计引物,PCR扩增CBS基因并将其慢病毒过表达载体GV341,将已构
研究背景与目的 最近研究发现槟榔中的主要生物碱槟榔碱(Arecoline)具有神经毒性作用,其神经毒性与其诱导细胞凋亡和氧化应激有关.硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)不仅仅是一种新型的中枢系统神经调质,而且是一种具有抗凋亡和抗氧化应激作用的神经保护剂.瘦素(leptin)是由脂肪细胞分泌的一种激素,通过作用于在中枢神经系统(Central nervous system,CNS)广
研究背景与目的 慢性温和不可预知性应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)可诱导海马神经细胞氧化应激损伤.硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)具有神经保护的作用.脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotropic factor,BDNF)通过结合酪氨酸受体激酶B(Tyrosine protein kinase B,Trk
在临床实践中,药物治疗疗效与毒副作用存在显著的个体差异,并且这种差异受到个体遗传因素的显著影响.这一观点已被大量科学研究证实并由此发展成广泛影响临床实践的精准医学理念.支撑这一理念的核心内涵便是药物基因组学.在皮肤疾病领域,患者体量巨大,用药复杂,个体差异显著,然而相关研究却非常缺乏.
目的 在SD(Sprague-Dawley)大鼠腹腔注射链佐脲菌素(streptozotocin,STZ)建立糖尿病大鼠模型后,探讨硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)对糖尿病大鼠海马组织氧化应激和凋亡的拮抗作用及沉默信息因子Sirt-1 (Silent information regulator 1)是否涉及到H2S这种保护作用。方法 Elisa检测MDA (malondialde
背景与目的 目前,我们已经证实:新型气体信号分子硫化氢(Hydrogen sulfide,H2S)能拮抗甲醛(Formaldehyde,FA)的神经毒性.长期过度的自噬会损伤细胞并最终引起凋亡.瘦素(leptin)是一种小分子多肽类激素,近年来研究报道,瘦素参与了多种神经功能调节,并发挥了神经保护作用.为此,我们使用PC12作为神经细胞模型,从自噬和leptin方面探讨硫化氢抗甲醛诱导的神经细胞毒