蛋白激酶C抑制剂GF109203X诱导表皮细胞去分化的初步研究

来源 :第十一届全国再生医学(干细胞与组织工程)学术研讨会暨第七届全国组织工程与再生医学大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yeyuxx008
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  目的 探讨蛋白激酶C (protein kinase C,PKC)抑制剂GF109203X诱导表皮细胞去分化形成表皮干细胞的可能性。方法 (1)采用酶消化法和Ⅳ型胶原快速贴壁相结合的方法获得人原代表皮干细胞及表皮细胞。(2)将获得的细胞分为3组,实验组:原代表皮细胞培养2天后加GF109203X,终浓度为10μM;阴性对照组:原代表皮细胞培养2天后加等体积二甲基亚砜(DMSO);阳性对照组:同期分离培养的人在体表皮干细胞,培养2天后换液。倒置相差显微镜下观察培养细胞的生长状况,免疫细胞化学染色法对各组细胞行β1整合素、角蛋白19(keratin 19,CKl9)、CK14、CKl0单克隆抗体检测鉴定。结果 (1)快速黏附于Ⅳ型胶原的细胞群培养4d能形成明显克隆,免疫细胞学染色显示β1整合素、CK19及CKl4呈阳性表达,CK10阴性表达,为表皮干细胞;不能快速黏附于Ⅳ型胶原的细胞群培养4d无明显克隆形成,β1整合素、CK19及CKl4呈阴性表达,CKl0呈阳性表达,为已分化表皮细胞。(2)免疫细胞化学染色表明表皮细胞经GF109203X诱导培养2天后,实验组与阳性对照组细胞群β1整合素、CKl9、CKl4均呈阳性表达,但实验组较阳性对照组中细胞β1整合素、CKl9、CKl4阳性细胞数少,CKl0均呈阴性表达;阴性对照组中细胞群β1整合素、CK19及CKl4呈阴性表达,CKl0呈阳性表达。结论 GF109203X能够诱导表皮细胞去分化形成表皮干细胞,可能为表皮细胞去分化形成表皮干细胞提供一条非转基因途径,并为表皮细胞去分化形成诱导多能干细胞提供新的思路。
其他文献
  间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)除具有强大的自我更新能力和多向分化潜能外,还发挥重要的免疫调控功能,因此MSCs成为再生医学中种子细胞的重要来源之一.TNF
会议
神经系统疾病愈后欠佳,且常留下后遗症状,既往对神经系统后遗症状主要采用康复治疗,但近年研究成果显示,中枢神经系统损伤并非不可生的,其存在一定的再生能力,这就为干细胞移
会议
  目前大面积烧伤、糖尿病溃疡、褥疮等难愈创面的治疗仍缺乏有效的方法。自体细胞替代治疗及组织工程皮肤的运用虽为创面修复提供了新的思路,但均面临种子细胞来源有限的问
  目的 通过回顾性观察自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期乙肝后肝硬化,评估自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的疗效及安全性。方法1、从2009年2月~2012年5月,选择失代偿期
  背景 原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)是一种慢性进行性肝内胆汁淤积性肝病,最终可发展为肝纤维化和肝硬化。熊去氧胆酸(ursodeoxycholic acid,UDCA)
会议
  以原代肝细胞为种子细胞的模型体系在人工肝的体外构建研究中倍受关注。但其在体外单层培养中易于出现"去分化",即代谢酶系和转运蛋白表达及功能活性的丧失。因此,如何克
会议
  蝾螈是研究再生机制的优秀模式生物,尤其成年的蝾螈,其附属肢体拥有完全再生潜力.miRNA已被证明在肢体再生中发挥关键作用.本研究以蝾螈为模型,对截肢后六个关键时间点(0
会议
  类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性、对称性、多发性为主的自身免疫性疾病。早期主要表现为关节疼痛、肿胀,晚期可出现关节强直、畸形及关节功能严重受
会议
目的:探讨自体骨髓干细胞移植术治疗下肢动脉缺血性疾病的临床效果.方法:回顾性分析我科2011年1月~2014年12月对27例膝下缺血的患者行下肢血管造影检查,及临床表现确诊的下肢血
  Objectives: Stem cells provide potential treatment for Parkinson' s disease (PD).Since human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUC-MSCs) have been repo
会议