低过敏原性嵌合猫过敏原突变体的构建、表达及鉴定

来源 :广东省医学会第十六次耳鼻咽喉学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tanweitao610
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  背景 猫过敏原是常见的室内吸入性过敏原,在世界范围内普遍参与IgE介导的过敏反应.Feld 1作为猫过敏原中最主要的致敏原,目前已成为开发新的变应原特异性免疫治疗(Allergenspecific immunotherapy,ASIT)的理想蛋白分子.细胞因子在过敏性炎症反应中起着非常重要的调节作用.其中,IL-10是一种具有多种生物学活性的免疫抑制因子,对机体产生保护作用.本研究在实验室已经构建好的Fel d 1-IL-10(FIL)重组嵌合蛋白的基础上,为了降低重组蛋白的过敏原性,对Fel d 1基因上的MHC-Ⅱ类表位进行综合分析,确定抗原性改造的关键位点,通过基因工程定点突变技术对重组猫过敏原氨基酸序列中抗原值高的位点进行改造,将改造后的基因序列插入载体,转化至大肠杆菌中进行诱导表达,经透析复性后得到纯化的目的蛋白.本文为下一步嵌合猫过敏原的蛋白功能试验打下了坚实的基础.
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