【摘 要】
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根据旋毛虫新生幼虫期特异性基因pBK-CMV-N10序列设计引物,利用PCR技术将基因N10的信号肽去除后,用T/A法克隆到pMD-18T载体,转化至大肠杆菌NovaBlue,经鉴定及序列测定,结果显
【机 构】
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吉林大学人兽共患病研究所,吉林,长春,130062
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第五次会员代表大会暨第九次学术交流会
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根据旋毛虫新生幼虫期特异性基因pBK-CMV-N10序列设计引物,利用PCR技术将基因N10的信号肽去除后,用T/A法克隆到pMD-18T载体,转化至大肠杆菌NovaBlue,经鉴定及序列测定,结果显示成功克隆到N10基因.将重组质粒pMD-18T-N10进行酶切后连接到原核表达载体pET-28a中,重组质粒经鉴定后转化大肠杆菌BL21star(DE3).用IPTG诱导表达出与理论相符的融合蛋白,相对分子质量为38.7kDa,诱导4h的表达量占菌体总蛋白量的15％.并将N10重组蛋白提取可溶性融合蛋白,对其生物学特性进行初步鉴定,结果表明具有类似脱氧核糖核酸酶Ⅱ的活性。
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