基于多元线性回归分析的12批次首乌藤的肝毒性评价

来源 :中国毒理学会第十次全国毒理学大会论文集 | 被引量 : 0次 | 上传用户:flangxisi888
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目的首乌藤可安神养血,在临床上使用频次、疗程和剂量都远超首乌根。首乌根的不良反应已为大家所熟知,作为同一植物不同药用部位的首乌藤的不良反应却为大家所忽视。本研究探讨了首乌藤中肝毒性成分与不同产地的关系,为临床安全合理应用首乌藤奠定基础。材料与方法采用HPLC法,建立十二批次不同产地的首乌藤指纹图谱,色谱柱为Extend-C18 773450-902(4.6×250 mm,5μm),流动相0.1%磷酸水和甲醇,梯度洗脱,检测波长280 nm;柱温30℃,进样量5μL;采用MetaboAnalyst网站绘制十二批次首乌藤的聚类热图和PCA图;在一组SMMC-7721细胞中加入没食子酸、顺式二苯乙烯苷、反式二苯乙烯苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素甲醚等不同单体,另一组SMMC-7721细胞中加入不同单体的基础上再加入LPS,采用CCK8法对两组细胞进行细胞存活率测定,并采用SPSS27.0软件对12批次首乌藤潜在的肝毒性进行多元线性回归分析。结果建立了首乌藤的高效液相指纹图谱,确定7个共有峰,通过对照品保留时间定位指认没食子酸、顺式二苯乙烯苷、反式二苯乙烯苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素共6个成分。聚类热图和PCA图能较好地对不同来源的首乌藤进行分类,说明不同产地的首乌藤样品在品质上存在差异。CCK8的结果表明,在没食子酸、顺式二苯乙烯苷、反式二苯乙烯苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素甲醚的影响下,SMMC-7721细胞的平均存活率分别为87.18%、86.47%、93.68%、78.74%、48.17%、63.23%、76.03%;在LPS诱导后,细胞平均存活率变为76.16%、79.62%、71.78%、71.15%、33.21%、60.14%、73.98%。多元线性回归分析的结果显示,S6批次的首乌藤潜在肝毒性最强,其次是S9、S10、S2、S1、S12、S7、S8、S5、S11、S4、S3。结论建立的HPLC指纹图谱及成分差异的分析结果能较好地辨认首乌藤的质量差异,细胞实验表明LPS联用可以加强这些单体的肝毒性,提示首乌藤导致的肝损可能是特异质肝损,利用多元线性回归分析对12个批次的首乌藤进行肝毒性评价,为临床更加安全合理应用首乌藤提供参考,对首乌藤的肝毒性评价具有一定的指导意义。
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