【摘 要】
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香叶醇还原为香茅醇是合成植醇生产维生素E和维生素K的首步反应,通常采用酵母(Saccharomycescerevisiae) 作为全细胞生物催化剂进行香叶醇的生物还原,但究竟是酵母的哪一
【机 构】
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植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室,中国科学院昆明植物研究所,昆明,650201
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香叶醇还原为香茅醇是合成植醇生产维生素E和维生素K的首步反应,通常采用酵母(Saccharomycescerevisiae) 作为全细胞生物催化剂进行香叶醇的生物还原,但究竟是酵母的哪一个酶在起作用一直未见报道.近来发现,有一类老黄酶(old yellow enzyme,简称OYE)能够催化含吸电子基团(如酮、醛、酸、酸酐、酯、内酯、硝基等)的α,β不饱和碳-碳键发生不对称还原反应,生成多至两个手性中心,具有较强的立体选择性和区域选择性,在手性催化上显示出良好的应用潜力.已克隆表达的OYE来自细菌(Bacillus,Zymomonas)、酵母(Saccharomyces,Candida)和番茄等,催化底物包括含活化双键的cyclohexenone、ketoisophorone、maleimide,2-phenyl-1-nitropropene、2,4,6-trinitrotoluene、2-alkenals等.相对于含吸电子基团的α,β不饱和双键,香叶醇的烯丙醇双键不属于上述活化双键的范围,而且通常认为老黄酶对烯丙醇双键无作用.本文克隆了酵母和三种植物包括橡胶、香茶菜、淫羊藿的OYE基因,并在大肠杆菌中超量表达了可溶蛋白,GC-MS检测发现重组菌全细胞和重组蛋白能够还原香叶醇生成唯一产物香茅醇(Fig.1),研究还证实酵母和橡胶来源的重组酶活性最高.
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