桃褐腐病拮抗放线菌的筛选鉴定及抑菌机理研究

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桃褐腐病是严重为害核果类水果生产的世界性病害,我国褐腐病菌的主要优势种是美澳型核果链核盘菌(Monilinia fructicola)。目前,关于放线菌防治植物病害的报道很多,但是针对桃褐腐病拮抗放线菌的研究鲜见报道。因此本研究从非农田生态系统(如森林、竹林、草地等)采集了15份根际土壤样品,通过稀释平板涂布法于高氏一号培养基中对土壤中的放线菌进行了分离纯化,共获得410株放线菌。以桃褐腐病病菌作为目的菌,采用对峙培养法,对所得菌株进行了初筛和复筛,得到27株具有较好生防潜力的放线菌菌株,对菌丝生长的抑制率范围为61.11%~82.32%。在后续的抑菌机理试验中,拮抗菌的无菌发酵滤液对桃褐腐菌丝生长的抑制作用测定,只有XDS1-5和HCD1-10两株菌株有明显抑制作用,抑制率分别为80.29%、70.64%。采用双皿对扣法测定拮抗菌体外挥发性成分对褐腐菌的影响试验中,其挥发性产物对褐腐菌菌丝的生长无明显抑制作用,但均在不同程度上抑制了褐腐病菌分生孢子的产生,对照CK的孢子量为4.3×10~6个孢子/mL,其中有ZBY1-8,CC1-18,LCD2-1等14株放线菌菌株几乎完全抑制了桃褐腐病菌孢子的产生,显示出了较好的生防潜力。而XDS1-5和HCD1-10两株菌株的孢子量分别为1.67×10~4个孢子/mL、1.5×10~4个孢子/mL,对褐腐病菌孢子的产生有一定的抑制作用。后续笔者将进一步对拮抗菌挥发性抑菌代谢产物进行鉴定和分析。对这27株放线菌菌株用16S rDNA的细菌通用引物27F/1492R对分离物进行PCR扩增及测序,测定结果获得的序列在NCBI上比对,初步鉴定为链霉菌属(Streptomyces sp.)。
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