目的 胚胎-胎仔发育毒性试验中骨骼标本制备的好坏是关系到整个实验成败的关键,通过家兔胎仔骨骼进行单染和双染方法的对比观察,比较两种染色方法的优缺点。方法 孕兔于妊娠第28天剖官检查,取出胎仔,剥皮并祛除内脏,摘除颈部和背部脂肪,于95％乙醇固定24 h,次日分单染法和双染法分别进行染色,以对两种染色效果进行比较。单染法以含氢氧化钾的茜素红染液染色,然后逐级进行透明和脱色处理；双染法以阿利新蓝染液和含氢氧化钾的茜素红染液两种分步染色,然后逐级进行透明和脱色处理。结果 (1)单染法操作简便,影响染色效果因素较少,但只能对硬骨染色,而双染法能将已骨化的骨骼染成红色或紫红色,软骨染成蓝色,其他组织呈无色透明状,颜色对比鲜明,能有效的发现硬骨及软骨发育异常；(2)双染法染色步骤繁琐,影响着色因素较多,首先阿利新蓝染色时应控制好时间,防止染色过深致标本整体颜色较深,影响后续骨骼检查；其次双染法染色分为两步,应注意透明和脱色时间适当延长；(3)另外由于家兔胎仔较大,两种染色方法染色过程中均应注意及时翻动标本,避免标本与染液接触不均致标本局部染色过深或过浅。结论 采用阿利新蓝和茜素红两种染液染色的方法能直观的展现硬骨和软骨的发育状况,能获得最佳实验数据,是骨骼染色较好的选择。