【摘 要】
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[目的]探讨更为简捷的高效液相色谱法(High-performance liquid chromatography,HPLC)测定大鼠血清和肝脏组织中壬基酚(Nonylphenol,NP)的含量.[方法]大鼠血清检测,以血
【机 构】
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遵义医学院公共卫生学院,贵州遵义563099
【出 处】
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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
论文部分内容阅读
[目的]探讨更为简捷的高效液相色谱法(High-performance liquid chromatography,HPLC)测定大鼠血清和肝脏组织中壬基酚(Nonylphenol,NP)的含量.[方法]大鼠血清检测,以血清体积1：8加入提取剂(正已烷与乙醚体积比7：3),置旋涡混合器混匀30 s,静置15 min,取上清液于50℃水浴蒸干,加入血清等体积的乙腈溶解后移至进样瓶上机检测.肝脏组织,加入肝脏重量比为1：8的提取剂(正已烷与乙醚体积比7∶3),手持式匀浆机20000 r/min匀浆5～10 s,4000 r/min离心10 min,取上清液于50℃水浴蒸干,加入肝脏组织等重量的乙腈溶解后移至进样瓶上机检测.分离色谱柱为Eclipse XD8-C 18,150mm×460mm,5um(美国安捷伦公司),乙腈-0.1％乙酸为流动相,柱温40℃,在激发波长275 nm,发射波长312nm,荧光检测器(Fluorescence detector,FLD)检测.标准曲线绘制,精确称取NP标准品(Fluka),用乙腈溶解稀释成9,45,90,450,900,1800,3600,12000 ng/ml,分别进样10ul,测定峰面积,以峰面积(Y)对标准浓度(X)绘制标准曲线,得出回归方程y=0.1726x|0.2664 (R2=0.999).将血清和肝脏组织中检测出的峰面积带入回归方程,计算出样品中NP含量.[结果]血清与肝脏组织中NP含量与峰面积成良好的线性关系,线性范围为9～ 12000 ng/ml,检出限为3.84 ng/ml,加标回收率在85.7％～995.％,日内精密度为0.34～1.21％,日间精密度为0.91％～1.82％,均小于2％.[结论]本方法与常规方法相比,方法更简便,准确,灵敏,回收率高,用弱酸做流动相,无盐类晶体残留在仪器中,保护了精密仪器,且检测效率高,改良了动物血清与肝脏组织中NP含量的检测方法.
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