论文部分内容阅读
[目的]初步观察2,5-己二酮(2,5-hexanetione,HD) HD染毒大鼠感觉运动型多发性周围神经病变时坐骨神经Schwann细胞(SC)中特异性反映其功能和活化状态的S100B蛋白与mRNA表达变化,为HD导致的感觉运动型周围神经病变的发生、发展、控制提供理论依据.[材料和方法]SPF级健康Wistar雄性大鼠随机分为低和高2个剂量组,分别为100和300 mg/(kg.d),同时设生理盐水对照组.将HD溶于生理盐水中,经腹腔注射染毒,每周染毒5d,每日1次,连续8w(经神经行为学测定模型建立成功).处死一半动物并分离、保存坐骨神经,用于电镜观察以及构成S100B蛋白的亚基S100β免疫组化测定、实时荧光定量PCR (RT-PCR)测定.免疫组化图片经3D HISTECH数字切片扫描系统扫描、200倍截图后,采用Image-Pro Plus分析软件分析积分光密度(IOD)值,并用SPSS软件进行统计学处理.RT-PCR中计算基因表达相对量2-△△Ct.另一半动物停止染毒、自然恢复8w后取材.[结果]高剂量组动物染毒后第3w起皮毛不光滑、色黄、稀疏等异常,活动减少,体重增长缓慢或负增长,行走步态异常,后肢瘫痪等.第4w起动物后肢尾部热痛觉敏感度降低,后肢足跖压痛觉、后肢热痛觉痛觉阈值升高.第9w停止染毒后,中毒症状逐渐减轻,但未完全恢复.低剂量组动物中毒表现相对较轻,但后肢无瘫痪发生,停止染毒后基本恢复.电镜检查可见对照组髓鞘厚薄较均一、形态较相近,无髓鞘脱落、轴索肿胀.实验组染毒8w时髓鞘厚薄不均、大小不一、板层紊乱、形态各异,部分髓鞘中间脱落、向轴突内部突起或轴索肿胀.染毒8w时100和300mg/(kg.d)剂量组中S100β表达量分别为对照组的99%和122%,染毒终止、恢复8w后为177%(p<0.05)和259% (p<0.01).染毒8w时S100β mRNA表达水平均降低,为对照组的0.60和0.51倍, 染毒终止、恢复8w后分别为1.36和0.66倍.[结论]HD染毒大鼠中毒性周围神经病变坐骨神经SC中S100B蛋白表达发生明显变化,且变化和挤压、离断等方式导致的急性周围神经损伤过程中S100B的变化以不一致,提示慢性、亚慢性暴露发方式不同于急性损伤,其S100β蛋白含量变化与mRNA表达不一致.