【摘 要】
：
根据发表的AEV序列设计一对引物，利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术，在体外从AEV分离株L2Z株感染的SPF鸡胚病变组织中扩增出VP0基因。将VP0基因克隆到质粒pBssK载体的Kpn I酶切位点上，构建成含有VP0基因的重组质粒VP0-pBssK。进一步序列分析表明 ，该基因长726bp，编码242个氨基酸，与AEV1143株的核苷酸和氨基酸的同源性分别为95.2 ℅和97.5℅。
【机 构】
：
北京市农林科学院畜牧医研究所(北京) 华南农业大学动物科学系(广州)
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会禽病学分会第十次学术研讨会
论文部分内容阅读
根据发表的AEV序列设计一对引物，利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术，在体外从AEV分离株L2Z株感染的SPF鸡胚病变组织中扩增出VP0基因。将VP0基因克隆到质粒pBssK载体的Kpn I酶切位点上，构建成含有VP0基因的重组质粒VP0-pBssK。进一步序列分析表明 ，该基因长726bp，编码242个氨基酸，与AEV1143株的核苷酸和氨基酸的同源性分别为95.2 ℅和97.5℅。与小RNA病毒科其它病毒属相应基因的氨基酸同源性比较发现，该病毒与人甲 肝病毒同源性最高，在系统进化树上，与甲肝病毒之间距离最近，表明AEV与甲肝病毒之间 亲缘关系密切，给AEV病毒的确切分类提供了重要的实验数据。
其他文献
2002至2003年在我国东北、华南、华中和华北地区采样,得到泄殖腔拭子292份、饲料和水29份、鸡舍尘土和垫料28份,共349份.用麦康凯培养基分离大肠杆菌,共分离到大肠杆菌241株(东北地区分离到大肠杆菌107株;华南地区分离到大肠杆菌107株;华中地区分离到大肠杆菌12株;华北地区分离到大肠杆菌15株),分离率为69.1﹪.血清型有数十种,呈地区性和多样性分布,主要1-2株占1种血清型,有些
用H5亚型禽流感强毒株分别对肉用成年鸽和广场鸽进行人工感染试验,采用临床症状观察、病理剖检、病毒的分离、荧光RT-PCR和血凝抑制试验的方法,对不同阶段受试验鸽和病毒的复制规律等进行了系统的观察和研究.试验结果表明(1)鸽子对H5亚型禽流感病毒易感性很差;(2)鸽子将禽流感病毒传播给家禽的几率极低.本文还对鸽子H5亚型禽流感实验感染模型的建立、抗体反应及模型中发生的一些问题进行了分析和讨论.
对鸭HPAI的预防除了采取严格的生物安全措施外,在受威胁的地区可以考虑进行疫苗的免疫预防.HPAI疫苗主要有单价或多价的油佐剂全病毒灭活疫苗,美国已批准在将来消灭HPAI时可使用H5亚型禽流感病毒HA禽痘病毒重组苗.许多研究表明,全病毒灭活疫苗对鸡和火鸡可刺激产生抗体并具有很好的保护作用.而对鸭HPAI疫苗的研究很少,本试验通过对商品雏鸭免疫接种国内生产禽流感疫苗,采用血凝抑制试验对免疫鸭的抗体动
本文选用一日龄天府肉鸭健雏210只,随机分为三组,分别喂以对照日粮(Cu 12.16mg/kg)、中毒I日粮(Cu 850mg/kg)和中毒日粮(Cu 1050mg/kg)七周,以实验病理学方法首次系统地观察研究了铜中毒对雏鸭器官组织影响的形态学变化.中毒Ⅱ组、中毒Ⅰ组雏鸭分别于二周龄和三周龄开始出现临床症状,死亡15只和5只.病理形态学观察发现两个中毒组的病变与程度基本一致,表现为肌胃角质层增厚
采用鸭胚成纤维细胞培养从山东和北京两地暴发的鸭瘟临床病例中分离到两株鸭肠炎病毒(DEV),分别命名为SD和BJ.利用细胞滴片技术,以制备的单抗2G为基础,建立单抗介导的间接免疫荧光(IFA)检测方法,对SD株感染细胞进行间接IFA检测,可见明显的蓝绿色荧光.试验感染7日龄雏鸭可引起鸭肠炎的典型临床症状,死亡率为100﹪(3/3),取试验感染死亡鸭肝脏、胰脏、法氏囊和脑组织等制备石蜡包埋切片,利用单
本研究对新疆某专业蛋种鸡场的一群高兰褐壳蛋种鸡分别于18周龄和32周龄接种了禽流感H5亚型和H9亚型的双价灭活油乳剂疫苗,并对商品代雏鸡进行了母源抗体检测,结果证明,该商品代蛋雏鸡的禽流感H5亚型的母源抗体持续期约为20天,并随日龄增长而缓慢下降,而H9亚型的母源抗体持续期约为10天,10天之后抗体迅速下降.
通过形态特性检验，常规生化试验，API-20NE生化试剂盒检验、PCR检验和血清学检 验从疑似副鸡嗜血杆菌的野外分离株中鉴定出2株鼻气管鸟疫杆菌。
该研究用表达ALV-J囊膜蛋白基因产物的Sf9细胞免疫Balb/c小鼠，取其脾脏细胞与骨髓瘤细胞NS1进行融合，获得了4株特异性抗ALV-J的单克隆抗体。免疫荧光分析结果表明， 三株单克隆抗体仅与所试验的ALV-J毒株反应，而不能与ALV的A、B、C、D和E亚群的毒株反 应。有趣的是，有一株单克隆抗体可以与所有试验的外源性ALV毒株反应，但不与内源性的E亚群反应。Western Blot和免疫沉淀
从13日龄发生贫血病肉仔鸡组织中分离到鸡传染性贫血病病毒(CAV)，分离物接种于1日龄SPF雏鸡可复制出本病。分离物接种于MDCC-MSB1细胞，可引起细胞死亡，感染细胞用间接免疫荧光检测可与已知阳性血清反应，感染细胞悬液接种于1日龄SPF雏鸡同样可复制出本病。分离物能被已知CAV阳性血清所中和，并能利用PCR技术扩增出特异性寡聚核苷酸片段。分离物经70℃5min、50℅氯仿15min处理后，可引
将新城疫病毒(NDV)F48E8株融合蛋白基因导入鸡痘病毒(FPV)插入载体pFG1175-1的P7.5启动子下游，得到转移载体pFGF1175-1重组质粒。采用脂质体转染技术，将该质粒转染FPV282E4株感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)。经过多次蓝斑筛选纯化，获稳定的重组病毒rFPV-NDF。间接免疫荧光试验表明，rFPV-NDF感染的CEF中表达了NDV的融合蛋白。用rFPV-NDF免疫 的S