【摘 要】
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本文叙述了采用热TRIzol法时牛精子进行总RNA的制备、检测和分析。结果表明：虽然通过琼脂糖凝胶电泳检测不到牛精子总RNA中的18S和28S rRNA，但是对总RNA进行RT-PCR检测结果显示：无论是以新鲜精子为实验材料，还是以冷冻精子为实验材料，热TRIzol法都成功的提取到的牛精子总RNA，且总RNA具有良好的完整性;总RNA提取前的裂解过程也能有效去除精子中的体细胞污染。由此可见，热TR
【机 构】
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中国农科院畜牧兽医研究所 北京 100020 内蒙古农业大学内蒙古 呼和浩特 010020 中国农
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十四届学术研讨会
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本文叙述了采用热TRIzol法时牛精子进行总RNA的制备、检测和分析。结果表明：虽然通过琼脂糖凝胶电泳检测不到牛精子总RNA中的18S和28S rRNA，但是对总RNA进行RT-PCR检测结果显示：无论是以新鲜精子为实验材料，还是以冷冻精子为实验材料，热TRIzol法都成功的提取到的牛精子总RNA，且总RNA具有良好的完整性;总RNA提取前的裂解过程也能有效去除精子中的体细胞污染。由此可见，热TRIzol法是一种提取牛精子总RNA的有效方法。
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采用热TRIzol法裂解新鲜精子和冷冻精子细胞制备精子全蛋白及总RNA，并采用选择性PCR技术建立了鲜冻精子正反向cDNA消减杂交文库，对文库进行了序列测定和部分数据的生物信息学分析，同时采用双向电泳技术方法对鲜冻精子全蛋白进行了分离分析和比较，找到了一些在质和量上存在差异的蛋白点，以部分阶段性结果分析了冷冻对精子基因表达所造成的重要影响。
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