左旋紫草素对非雄激素依赖型前列腺癌PC3细胞的作用及其机制

来源 :2013中国中西医结合泌尿外科专业委员会第11次全国学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mir80
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  目的:探讨左旋紫草素诱导雄激素非依赖型前列腺癌PC3细胞凋亡的作用及其可能机制.方法:1、MTT法检测左旋紫草素对PC3细胞增殖的抑制作用:实验分6组:对照组(只加DMSO)及加入不同浓度的左旋紫草素组(2、4、8、16、32 u mol/L),作用PC3细胞24 h后收集细胞,MTT法检测细胞生长抑制率;2、MTT法检测caspase3、caspase8及caspase9抑制剂对左旋紫草素抑制PC3细胞增殖的影响:实验分4组,分别加入DMSO、z-DEVD-fmk、z-IETD-fmk及z-LEHD-fmk,lh后加入左旋紫草素,24 h后收集细胞,MTT法计算细胞生长抑制率;3、流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率:对数生长期PC3细胞加入8 u mol/L的左旋紫草素,分别培养0、12、24、48 h后收集细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率;4、荧光分光光度计测量Caspase 3的活性:8 μ mol/L浓度的左旋紫草素作用PC3细胞,分别在0、6、12、24、48、72 h收集细胞,检测Caspases 3的活性.结果:Shi能抑制PC3细胞的增殖,呈剂量、时间依赖性,作用24h的半数有效抑制浓度IC50为(7.91±0.73)u mol/L;8 μ mol/L的Shi作用24h可引起PC3细胞的凋亡;同时检测Caspases 3的活性24h比对照组增加了近6倍;应用各种Caspase抑制剂后发现Caspase 3及Caspase 9的抑制剂可显著逆转Shi对PC3细胞增殖的抑制作用.结论:Shi可通过激活Caspase 9及Caspase 3途径诱导PC3细胞的凋亡.
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