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[目的]分析人CYPl9A1基因启动子区PI.3(-234至-345bp)、P II(-517至-228bp)和P1.7(-299至+81bp)在乳腺癌细胞和骨组织中的活性。
[方法]通过脂质体转染法将pGL3-Basic-PI.3(-234至-345bp),pGL3-Basic-P II(-517至-228bp)和pGL3-Basic-PI.7(-299至+81bp)分别与Renilla内参质粒共转染于MCF-7、Bcap-37、MG-63及HEK-293细胞,应用双荧光素酶报告基因检测试剂盒测定启动子活性。
[结果]转染48 h后,在MCF-7细胞株中,PII、PI.3和PI-7活性均显著下降(P=0.001、0.001、0.001)；在Bcap-37细胞株和MG-63细胞中,PII、PI.3,及PL7活性亦均显著下降(P=0.000、0.000、0.000).在HEK.293细胞株中,PII、PI-3和PL7活性均显著下降(P=0.001、0.001、0.002).以pGL3-Basic的转录活性为1,PII在MCF.7、Bcap-37及MG-63细胞中的转录活性分别为0.011、0.002、0.006；PI.3则分别为0.018、0.009、0.018；而PI.7分别为0.024、0.069、0.014.PII在MCF.7细胞中的活性是Bcap-37细胞中的5.5倍.是MG.63细胞中的1.8倍：PI.3在MCF-7中的活性是Bcap-37中的2倍,而与MG-63细胞中的活性相同；PI.7在MCF-7细胞中的活性是在Bcap-37中活性的0.347倍.是MG-63中的1.7l倍.
[结论]PI.3(-234至-345bp)、P II(-517至-228bp)和P I.7(-299至+81bp)似乎为功能抑制区域,且在不同细胞中的活性存在一定差异。
[方法]通过脂质体转染法将pGL3-Basic-PI.3(-234至-345bp),pGL3-Basic-P II(-517至-228bp)和pGL3-Basic-PI.7(-299至+81bp)分别与Renilla内参质粒共转染于MCF-7、Bcap-37、MG-63及HEK-293细胞,应用双荧光素酶报告基因检测试剂盒测定启动子活性。
[结果]转染48 h后,在MCF-7细胞株中,PII、PI.3和PI-7活性均显著下降(P=0.001、0.001、0.001)；在Bcap-37细胞株和MG-63细胞中,PII、PI.3,及PL7活性亦均显著下降(P=0.000、0.000、0.000).在HEK.293细胞株中,PII、PI-3和PL7活性均显著下降(P=0.001、0.001、0.002).以pGL3-Basic的转录活性为1,PII在MCF.7、Bcap-37及MG-63细胞中的转录活性分别为0.011、0.002、0.006；PI.3则分别为0.018、0.009、0.018；而PI.7分别为0.024、0.069、0.014.PII在MCF.7细胞中的活性是Bcap-37细胞中的5.5倍.是MG.63细胞中的1.8倍：PI.3在MCF-7中的活性是Bcap-37中的2倍,而与MG-63细胞中的活性相同；PI.7在MCF-7细胞中的活性是在Bcap-37中活性的0.347倍.是MG-63中的1.7l倍.
[结论]PI.3(-234至-345bp)、P II(-517至-228bp)和P I.7(-299至+81bp)似乎为功能抑制区域,且在不同细胞中的活性存在一定差异。