【摘 要】
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烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)是烟草花叶病毒属病毒的典型成员,其寄主范围非常广泛,TMV和ToMV亲缘关系较近,基因组均为单链正义RNA,大小约为6.4kb.该属基因编
【机 构】
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西南大学植物保护学院,重庆400716
【出 处】
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中国植物保护学会第十一次全国会员代表大会暨2013年学术年会
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烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)是烟草花叶病毒属病毒的典型成员,其寄主范围非常广泛,TMV和ToMV亲缘关系较近,基因组均为单链正义RNA,大小约为6.4kb.该属基因编码3个非结构蛋白和17.5kDa的外壳蛋白,其中,126kDa和183kDa蛋白参与病毒的复制,称为RNA依赖的RNA聚合酶(RNA dependent RNA polymerase,RdRP);183kDa的蛋白是126kDa蛋白的阅读框终止子通读的产物;30kDa蛋白参与病毒在寄主细胞间的移动,称为运动蛋白(Movement protein,MP);17.5kDa的蛋白为病毒的外壳蛋白(Capsid protein,CP).目前,本实验室通过酵母双杂交技术和免疫印记技术对ToMV CP与FdI以及IP-L互作分析进行了研究,结果表明,ToMV CP与FdI以及IP-L不但在酵母细胞内存在互作并且在烟草活细胞内也可相互作用.为了进一步明确ToMV与几种茄科寄主存在着互作的共性机制,本研究通过RT-PCR方法从不同品种烟草以及番茄、辣椒、茄子这几种茄科寄主中扩增出了与CP互作的IP-L和FdI的同源基因.将目的片段与pGEM-T载体连接,转入大肠杆菌,经过克隆测序结果表明,在几种寄主中IP-L同源基因核苷酸的相似性为88.4% ~ 100%,编码蛋白氨基酸的相似性为80.3% ~ 99.4%;而几种寄主中FdI的核苷酸相似性为87.4% ~ 100%,氨基酸的相似性为87.4%~99.3%.在此基础上,进一步地通过RT-PCR体系检测不同寄主中与TMV CP互作基因表达水平的变化,对于研究寄主成分和病毒基因产物究竟是如何相互作用有重要的意义,对探索新的植物病毒防治途径具有一定的理论参考价值.
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