【摘 要】
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目的 研究TLR4在小鼠胰岛细胞株(MIN6)上的表达及LPS作用后TLR4表达量的变化。方法 培养小鼠胰岛细胞株MIN6,将MIN6传入放有小圆玻片的24孔板中,培养24h贴壁,做细胞免疫
【机 构】
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200092 上海交通大学医学院附属新华医院
【出 处】
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中华医学会第九次全国内分泌学学术会议
论文部分内容阅读
目的 研究TLR4在小鼠胰岛细胞株(MIN6)上的表达及LPS作用后TLR4表达量的变化。方法 培养小鼠胰岛细胞株MIN6,将MIN6传入放有小圆玻片的24孔板中,培养24h贴壁,做细胞免疫荧光,以山羊抗小鼠的TLR4抗体及F1TC标记的抗羊二抗在荧光显微镜下检测TLR4有元表达；将MIN6分别组,以牛血清白蛋白(BSA)作为对照,以LPS 100 μg/L作用一定时间(2、24、48 h),Trizol抽提各组细胞RNA,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(Real Time PCR)检测TLR4表达量的变化；分别抽提两组细胞膜蛋白,Western印迹法检测两组TLR4蛋白表达的变化。
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