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目的 了解亚砷酸钠(NaAsO2)染毒人皮肤角质形成细胞株(HaCaT细胞)对其着色性干皮病基因D(XPD)启动子区甲基化、mRNA转录及蛋白表达的影响.方法 NaAsO23.13,6.25, 12.5和25μmol·L-1重复间隔处理HaCaT细胞72 h(NaAsO2处理HaCaT细胞24 h,隔天再次用NaAsO2进行相同处理,重复3次)；同时以不染毒HaCaT细胞为空白对照(0 μmol·L-1)；各剂量组及空白对照均设三个平行样本.重亚硫酸盐测序-定量甲基化特异性PCR法检测XPD基因启动子区CpG岛甲基化状态,实时荧光定量PCR法检测XPD基因mRNA表达,Western blot法检测XPD蛋白表达.结果 NaAsO2 3.13,6.25, 12.5和25 μmol·L-1处理细胞后,XPD基因甲基化参照百分比(PMR)分别为(1.55±0.76)％,(4.84±1.98)％,(22.99±5.1)％和(33.69±7.57)％,空白对照未检出甲基化,差异有统计学意义(x2 =13.13,P＜0.05).对PCR产物进行电泳,NaAsO2 6.25,12.5和25 μmol·L-1剂量组出现阳性条带,进行凝胶DNA回收并克隆测序,测序结果显示NaAsO26.25,12.5和25 μmol· L-1组XPD基因启动子区13个CpG位点甲基化率分别为11.1％,42.7％和64.1％,NaAsO2 12.5和25 μmol·L-1组分别与NaAsO26.25 μmol·L-1组比较差异有统计学意义(P＜0.05).随NaAsO2剂量增加XPD mRNA转录表达明显降低(F=31.93,P＜0.05),NaAsO2 6.25,12.5和25 μmol·L-1组中XPD mRNA表达明显低于空白对照,差异有统计学意义(P＜0.05).与空白对照比较,XPD蛋白表达在低剂量组(3.13 μmol·L-1)略有升高,后随NaAsO2浓度的增加而逐渐降低(F=110.77,P＜0.05),NaAsO2 6.25,12.5和25 μmol· L-1组中XPD蛋白表达明显低于空白对照,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 砷可导致XPD基因高甲基化改变,继而引起XPD基因mRNA及蛋白表达受抑,其可能通过影响XPD蛋白对受损DNA的解旋,继发性抑制DNA修复,促进砷中毒乃至皮肤癌的发生发展.